Biologická mikroskopia na objeme tkanivových blokov
Biomikroskopia K dnešnému dňu sú fixácia ľadovým chladom, zmrazené ultratenké rezy a manipulácia so zmrazeným suchom rutinnými metódami pre röntgenové mikropolia tkanív a buniek. Podrobnosti metódy sú vysvetlené v nasledujúcich bodoch:
Biologické mikroskopy Mikroskopy s kondenzorovou šošovkou je možné posúvať nahor a nadol, aby sa dosiahol mierny jas, alebo je možné zmeniť apertúru variabilného svetelného expandéra na dosiahnutie miernej jasnosti 9b. Ak je svetlo slnečné, pozorovací ďalekohľad sa môže primerane zvýšiť a clona premenlivého svetla sa môže primerane zväčšiť. Ak je svetlo príliš silné, potom zrkadlo reflektora môže byť vhodné dole, clona premenlivého svetla skok pre primerané zníženie. Ak sa v tomto prípade stále cítite oslepujúci, môžete si vybrať vhodný filter umiestnený v držiaku pod reflektorom. To je možné získať, aby ste boli spokojní s jasom. Samozrejme, pri nastavovaní hornej a dolnej polohy kondenzorovej šošovky je možné meniť veľkosť clony odčítania svetla a výber vhodných filtrov, teda po určitej dobe praxe a skúseností.
Biologický mikroskop Veľmi dôležitou otázkou je proces odberu vzoriek a separácie buniek, lyofilizácia a zalievanie živice (FD) po zmrazení ultrabookletov, lyofilizácia po jemnom chode každej časti obsahu 65 prvkového zloženia musí byť manipuluje veľmi opatrne a nesmie poškodiť bunky, ktoré sa majú pozorovať a analyzovať. Pretože röntgenová mikrooblastná analýza nie je len veľa krokov a náklady sú veľmi vysoké, ak po dlhom čase a viacerých krokoch spracovania sú analyzované bunky poškodené alebo mŕtve bunky, vyvodia sa nesprávne závery. je veľmi poľutovaniahodné. Napríklad kardiomyocyty izolované pôsobením kolagenázy majú dve morfológie, jedna má tvar dlhej tyčinky a druhá je okrúhla. Posledne menované sú odumierajúce bunky, ktoré boli poškodené počas izolácie buniek.
Biomikroskopia Obsah a distribúcia elektrolytov v týchto dvoch typoch článkov sú veľmi odlišné. Na bol veľmi vysoký a K veľmi nízky v okrúhlych kardiomyocytoch a koncentrácia ca bola veľmi vysoká v mitochondriách. Po kontrole inými analytickými metódami sa ukázalo, že vysoké Na a nízke K v okrúhlych bunkách a vysoké ca v mitochondriách boli výsledkom poškodenia bunkovej membrány počas bunkovej separácie. Fixácia buniek a tkanív za studena sa často uskutočňuje fixáciou ochladzovaním, po ktorej nasleduje konzervácia v tekutom dusíku. Pre účinnosť konzervácie je dôležitá fixácia zhášania. Živé bunky alebo čerstvé tkanivá sú bohaté na vodu, pri ochladzovaní často dochádza k priamemu kontaktu buniek alebo tkanív a chladiva (najmä s tekutým dusíkom čistým chladom) s časťami prvej fixácie zmrazením, čím sa vytvorí „škrupina“, ktorá zabraňuje stredu bunky fixácii chladom. Výsledkom je, že ľadové kryštály sa často nachádzajú v strede väčších buniek počas röntgenovej mikrocelulárnej analýzy. Aby sa tomu zabránilo, používajú sa ako chladiace činidlá látky s teplotou topenia vyššou ako kvapalný dusík, ale nižšou ako 806 c sušiny. Existuje veľa takýchto látok, ale * ľahko dostupný, lacný je koncentrovaný propán (bod varu 42,120 c, bod topenia 187,10 c, molekulová hmotnosť 44,1), rýchlosť chladenia * rýchla. Má však nevýhodu v tom, že je horľavý.
Biologický mikroskop je možné umiestniť na špeciálnu policu svalového vlákna, takže kontrakciu svalového vlákna na dosiahnutie určitej časovej fázy je potrebné zafixovať, ihneď spustiť trysku, aby sa tekutý propán dostal do prúdu svalového vlákna, aby sa zhášala chlad opravený. Potom sa svalové vlákno vyberie spolu so stojanom a vloží sa do tekutého dusíka. Ak sa fixujú krvinky alebo izolované bunky, najskôr nízkorýchlostná centrifugácia, aby sa bunky skoncentrovali, bunky sa prenesú do dobrej tepelnej vodivosti striebornej skúmavky, skúmavky do tekutého propánového korpusu za studena fixovaného. Hallov laboratórium fixovaný potkaní pankreas, prvé dva kusy ocele s predchladením tekutým héliom (alebo tekutým dusíkom), s upnutou svorkou dva kusy medi sa umiestnia pred a za pankreas, aby sa teta zhášanie žľazy fixácia za studena. Tkanivá alebo bunky môžu byť po ochladení a fixácii dlho skladované v tekutom dusíku.
