Porovnanie medzi konfokálnou mikroskopiou a konvenčnou optickou mikroskopiou
Mikroskop je hlavným nástrojom na pozorovanie buniek. Podľa rôznych svetelných zdrojov ho možno rozdeliť do dvoch kategórií: optické mikroskopy a elektrónové mikroskopy. Prvý používa viditeľné svetlo (ultrafialový mikroskop používa ultrafialové svetlo) ako zdroj svetla, zatiaľ čo druhý používa ako zdroj svetla elektrónový lúč. Bežné optické mikroskopy aj laserové konfokálne mikroskopy patria k optickým mikroskopom.
Bežný optický mikroskop
Bežný biologický mikroskop pozostáva z troch častí, a to: ① osvetľovací systém vrátane svetelného zdroja a kondenzora; ② Hlavným telom mikroskopu je optický zosilňovací systém pozostávajúci z objektívu a okuláru. Aby sa eliminovala sférická a chromatická aberácia, okulár aj objektív sú zložené z komplexných skupín šošoviek Mechanické zariadenie, ktoré sa používa na fixáciu materiálov a uľahčenie pozorovania.
Čistota obrazu mikroskopu nezávisí len od jeho zväčšenia, ale aj od jeho rozlíšenia. Rozlíšenie označuje schopnosť mikroskopu (alebo ľudského oka vo vzdialenosti 25 cm od cieľa) rozlíšiť objekty v malých intervaloch. Veľkosť rozlíšenia závisí od vlnovej dĺžky svetla, indexu apertúry a indexu lomu média. Vyjadruje sa ako: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, kde n=index lomu média; =uhol clony (uhol, pri ktorom preparát otvára clonu šošovky objektívu), NA=numerická clona. Je roh zrkadla vždy menší ako 180?, Takže maximálna hodnota zui pre sina/2 musí byť menšia ako 1.
Index lomu skla používaného pri výrobe optických šošoviek je 1.{1}}.78, a čím je index lomu použitého média bližšie k indexu lomu skla, tým lepšie. Pre suché objektívy je médiom vzduch a pomer clony je vo všeobecnosti 0.05-0.95; Olejová šošovka používa ako médium cédrový olej a pomer clony môže byť blízko 1,5.
Vlnová dĺžka bežného svetla je {{0}}nm, takže hodnota rozlíšenia mikroskopu nebude menšia ako 0,2 μm a rozlíšenie ľudského oka je 0,2 mm. Preto je maximálne zväčšenie pre návrh mikroskopu zvyčajne 1000X.
