(Rozdiely medzi (dvojfotónovými, konfokálnymi) fluorescenčnými mikroskopmi a bežnými mikroskopmi
Fluorescenčný mikroskop je použitie ultrafialového svetla ako zdroja svetla, ktoré sa používa na ožiarenie skúmaného objektu, takže objekt vyžaruje zdroj svetla a potom sa objekt pozoruje pod mikroskopom. Používa sa hlavne pre imunofluorescenčné bunky, ktoré pozostávajú hlavne zo svetelného zdroja, systému filtračných platní a optického systému na pozorovanie fluorescenčného obrazu vzoriek prostredníctvom zväčšenia okuláru a šošovky objektívu. Pozrime sa na fluorescenčný mikroskop a bežný optický mikroskop, aký je rozdiel.
1, v režime osvetlenia
Osvetlenie fluorescenčného mikroskopu je vo všeobecnosti padavým typom, to znamená, že zdroj svetla je cez šošovku objektívu nasadzovanú na testovanú vzorku.
2, v uznesení
Fluorescenčný mikroskop využíva ako zdroj svetla ultrafialové svetlo, vlnová dĺžka je relatívne krátka, ale rozlíšenie je vyššie ako u bežného optického mikroskopu.
3, rozdiel vo filtri
Fluorescenčný mikroskop spočíva v použití dvoch špeciálnych filtrov, v prednej časti zdroja svetla sa používa na odfiltrovanie viditeľného svetla, medzi šošovkou objektívu a okulárom na odfiltrovanie ultrafialového svetla, ktoré dokáže chrániť ľudské oko.
Fluorescenčný mikroskop tiež patrí k druhu optického mikroskopu, hlavne fluorescenčný mikroskop je vlnová dĺžka excitácie krátka, takže to viedlo k tomu, že fluorescenčný mikroskop a obyčajný mikroskop majú rôzne štruktúry konštrukcie a použitia rôznych, fluorescenčné mikroskopy majú väčšinou dobré zachytenie slabého svetla, takže v extrémne slabá fluorescencia, je to zobrazovacia schopnosť a dobrá. V spojení s neustálym zdokonaľovaním fluorescenčného mikroskopu v posledných rokoch sa výrazne znižuje aj šum. Preto sa čoraz viac používa fluorescenčné mikroskopy.
Dvojfotónový fluorescenčný mikroskop má mnoho výhod:
(1) Dlhšie vlnové dĺžky svetla sú menej ovplyvnené rozptylom ako kratšie vlnové dĺžky svetla ľahko prenikajú cez vzorku;
(2) Fluorescenčné molekuly mimo ohniskovej roviny nie sú excitované, takže viac excitačného svetla môže dosiahnuť ohniskovú rovinu, takže excitačné svetlo môže preniknúť hlbšie do vzorky;
3) Dlhšie vlnové dĺžky blízkeho infračerveného svetla sú pre bunky menej toxické ako kratšie vlnové dĺžky;
4) Pri použití dvojfotónového mikroskopu na pozorovanie preparátu sú fotobielenie a fototoxicita prítomné iba v ohniskovej rovine. Preto sú dvojfotónové mikroskopy vhodnejšie ako jednofotónové mikroskopy na pozorovanie hrubých vzoriek, na pozorovanie živých buniek alebo na uskutočňovanie experimentov s bodovým fotobielením.
