Metóda priameho počítania mikroorganizmov pomocou mikroskopu
Použitie hemocytometra na priame počítanie mikroorganizmov pod mikroskopom je bežne používaná metóda na počítanie mikroorganizmov. Výhodou tejto metódy je jej intuitívnosť a rýchlosť. Vhodne zriedenú bakteriálnu suspenziu (alebo suspenziu spór) vložte do počítacej komôrky medzi podložné sklíčko hemocytometra a krycie sklíčko a počítajte pod mikroskopom. Vďaka konštantnému objemu počítacej miestnosti (0,1 mm2) je možné celkový počet mikroorganizmov na jednotku objemu prepočítať na základe počtu mikroorganizmov pozorovaných pod mikroskopom. Vzhľadom na to, že táto metóda vypočítava súčet živých a mŕtvych bakteriálnych buniek, je známa aj ako metóda celkového počtu baktérií.
Platnička na počítanie krviniek je zvyčajne špeciálne navrhnuté sklenené podložné sklíčko so štyrmi drážkami, ktoré tvoria tri plošiny. Stredná plošina je rozdelená na polovicu krátkou horizontálnou drážkou a na každej strane plošiny je vyrytá mriežka. Každá mriežka je rozdelená na deväť veľkých štvorcov a veľký štvorec v strede je počítacia miestnosť, kde sa vykonáva mikrobiálne počítanie. Štruktúra doštičky na počítanie krviniek je znázornená na obrázku VIII-1.
Vo všeobecnosti existujú dve špecifikácie pre mierku počítacej miestnosti. Jedným z nich je, že veľký štvorec je rozdelený na 16 stredných štvorcov a každý stredný štvorec je ďalej rozdelený na 25 malých štvorcov (obrázok VIII -2); Ďalšou metódou je rozdeliť veľký štvorec na 25 stredných štvorcov a každý stredný štvorec sa ďalej rozdelí na 16 malých štvorcov (obrázok VIII -1, C). Ale bez ohľadu na veľkosť počítacej dosky je počet malých štvorcov v každom veľkom štvorci rovnaký, to znamená 16 × 25=400 malých štvorcov, ako je znázornené na obrázku VIII-2.
Ak je dĺžka strany každého veľkého štvorca 1 mm, plocha každého veľkého štvorca je 1 mm2. Po prekrytí krycím sklom je výška medzi podložným sklíčkom a krycím sklom 0,1mm, objem počítacej miestnosti je teda 0,1mm3.
Pri počítaní sa zvyčajne počíta celkový počet baktérií v piatich štvorcoch a potom sa získa priemerná hodnota každého štvorca. Vynásobením číslom 16 alebo 25 sa získa celkový počet baktérií vo veľkom štvorci, ktorý sa potom prepočíta na celkový počet baktérií v 1 ml bakteriálneho roztoku.
