Experimentálny postup pre priamu mikrobiologickú mikroskopickú metódu počítania
1. Riedenie
Suspenzia Saccharomyces cerevisiae na vhodné riedenie, bakteriálna kvapalina, napríklad nie hustá, sa nemôže riediť.
2. Kontrola zrkadla počítacej komory
Pred pridaním vzoriek by sa mala najskôr skontrolovať počítacia komora počítacej dosky. Ak sú nečistoty, je potrebné ich pred počítaním vyčistiť.
3. Pridanie vzorky
Čistá a suchá hematokritová doštička pokrytá krycím sklíčkom a následne aseptická byreta s jemným hrdlom sa zriedi tekutinou z pivovarských kvasníc od okraja krycieho sklíčka kvapky (nemalo by byť príliš veľa), aby bakteriálna tekutina pozdĺž medzery kapilárnou infiltráciou do počítacia komora, všeobecná počítacia komora môže byť naplnená bakteriálnou kvapalinou. Upozorňujeme, že by nemali byť žiadne vzduchové bubliny.
4. Mikroskopické počítanie
Po 5 minútach odpočinku umiestnite doštičku na počítanie krvi na nosič mikroskopu, najskôr nájdite umiestnenie komôrky na počítanie s malým zväčšením a potom zmeňte na veľké zväčšenie na počítanie. Ak sa zistí, že bakteriálna tekutina je pred počítaním príliš hustá alebo príliš riedka, je potrebné pred počítaním znovu upraviť riedenie. Vo všeobecnosti riedenie vzorky vyžaduje približne 5-10 organizmov v každej malej bunke. Pre každú počítaciu komoru sa spočítajú organizmy v 5 stredných kompartmentoch (je možné vybrať 4 rohy a stred prostrednej komory). Baktérie umiestnené na čiarach mriežky sa vo všeobecnosti počítajú iba na hornej a pravej čiare. V prípade pučania kvasiniek sa počítajú dva organizmy, ak je pučiace telo polovičné ako rodičovská bunka. Počítanie vzorky z dvoch počítacích komôr na spočítanie hodnoty na výpočet bakteriálneho obsahu vo vzorke.
5. Čistenie hematokritovej platne
Po použití doštičku na počítanie krviniek vo vodnej klietke opláchnite vodným stĺpcom, na umývanie a kefovanie nepoužívajte tvrdé predmety, umyte a osušte alebo vyfénujte fénom. Mikroskopicky skontrolujte platňu a sledujte, či sú v každom malom oddelení nejaké zvyškové organizmy alebo iné zrazeniny. Ak nie je čistý, umývanie sa musí opakovať, kým nebude čisté.
