Experimentálne kroky metódy priameho počítania mikroorganizmov pod mikroskopom
1. Riedenie
Primerane zriedite suspenziu pivovarníckych kvasníc. Ak bakteriálny roztok nie je koncentrovaný, nemusí sa zriediť.
2. Miestnosť na počítanie kontroly zrkadla
Pred pridaním vzoriek vykonajte mikroskopické vyšetrenie počítačnej komory počítania. Ak existuje špina, musí sa pred počítaním vyčistiť.
3. Pridajte vzorky
Zakryte čistú a suchú dosku na počítanie krviniek krytým sklom a potom pomocou sterilného kvapkadla s jemnými ústami spustite malú kvapôčku (nie príliš veľa) zriedenej pivovarníckej kvasinkovej kvapaliny z okraja krycieho skla, čo umožňuje bakteriálnu kvapalinu vstúpiť do počítania miestnosti cez kapilárnu permeaciu pozdĺž medzery. Všeobecne platí, že miestnosť na počítanie môže byť naplnená bakteriálnou tekutinou. Dávajte pozor, aby ste nevyrábali bubliny.
4. Počítanie mikroskopu
Po tom, čo stojíte 5 minút, umiestnite doštičku na počítanie krviniek na štádium mikroskopu, najskôr použite mikroskop s nízkym výkonom na lokalizáciu počítania a potom prepnite na počítanie na vysokovýkonný mikroskop. Ak sa zistilo, že bakteriálny roztok je príliš koncentrovaný alebo príliš zriedený pred spočítaním, riedenie by sa malo pred spočítaním upraviť. Všeobecná požiadavka na riedenie vzorky je asi 5-10 bakteriálne bunky na malú mriežku. Vyberte 5 buniek z každej počítačnej miestnosti (voliteľné 4 rohy a centrálne bunky) na počítanie. Bakteriálne bunky umiestnené na mriežkovej čiare sa vo všeobecnosti počítajú iba na horných a pravých čiarach. Keď klíčenie kvasiniek a veľkosť púčika dosahujú polovicu materskej bunky, odoberia sa dva bakteriálne počty. Počítanie vzorky vyžaduje získanie hodnôt z dvoch počítacích komôr na výpočet obsahu baktérií vo vzorke.
5. Vyčistite hemocytometer
Po použití opláchnite hemocytometer vodným stĺpcom na kohútiku. Neumývajte tvrdými predmetmi. Po umývaní vzduchu na vzduchu vyschnite alebo vyfúkne sušič vlasom. Mikroskopické vyšetrenie, pozorujte, či sú v každej malej bunke zvyšné baktérie alebo iný sediment. Ak nie je čistý, musí sa opakovane umyť, kým nebude čistý.
