Funkcie každého filtra vo fluorescenčnom mikroskope
Najkritickejším problémom fluorescenčnej mikroskopie je kombinácia optických filtrov. Budiaci filter aj tieniaci filter musia byť vhodné pre pozorovaný fluorescenčný materiál a musia byť navzájom prispôsobené. V prípade niektorých špecifických aplikácií, ak sa vyskytnú chyby pri výbere filtrov, môže to viesť k nedorozumeniam a dokonca k nesprávnym výsledkom. Úspechy technológie fluorescenčnej mikroskopie sú neoddeliteľné od vysoko-kvalitných filtrov a šikovne prispôsobených skupín filtrov. Existuje niekoľko typov filtrov pre fluorescenčnú mikroskopiu.
1. Filter absorbujúci teplo
Filter absorbujúci teplo je nevyhnutným filtrom, ktorý zabraňuje tepelnému žiareniu v spektre zdroja svetla poškodzovať optický systém. Skoré pokročilé mikroskopy boli vybavené fľašami v tvare bubna, ktoré mohli obsahovať destilovanú vodu ako zariadenia pohlcujúce teplo. Moderné-veľké výskumné mikroskopy sú vybavené sklenenými filtrami absorbujúcimi teplo vo svetelných boxoch svetelných zdrojov alebo lampových komorách, ktoré sú priehľadné a mierne žlté sklenené tabule. Leitzove filtre KG1 (2 mm) a BG38 (4 mm) dokážu prepustiť takmer všetky spektrá ultrafialového a viditeľného svetla s mierou priepustnosti svetla až 98 %. Iba selektívne absorbuje infračervené fototermické žiarenie.
2. Filter budenia
Excitačné filtre môžu selektívne absorbovať spektrálne čiary s dlhými vlnovými dĺžkami a prepúšťať iba ultrafialové svetlo. Filtre fialového, modrého a zeleného svetla sú excitačné filtre. Zeiss, Reichert, Olympus séria B, G séria, BG séria, Shottova séria UG, Optonova séria H, G, BP, Leitzova séria BP a ďalšie optické filtre sú všetky excitačné filtre.
3. Blokovací filter
Blokovací filter je filter, ktorý selektívne absorbuje krátkovlnné spektrálne čiary a infračervené lúče, pričom umožňuje vidieť dlhšie vlny. Jeho funkciou je umožniť pozorovateľovi vidieť fluorescenciu vybudenú kontrolovaným objektom a zároveň chrániť rohovku pozorovateľa pred poškodením UV žiarením.
4. Filter na separáciu farieb
Filter na separáciu farieb je zrkadlové zrkadlo, ktoré odráža excitačné svetlo na kontrolovaný objekt, čo spôsobuje, že objekt vyžaruje fluorescenciu, a potom fluorescenciu prenáša do okuláru. Tento typ filtra je možné použiť iba v kondenzore s padajúcim svetlom, zatiaľ čo fluorescenčný mikroskop v prechádzajúcom svetle nevyžaduje separáciu farieb.
5. Interferenčný filter
Filter rušenia je typ vysokovýkonného filtra budenia-. Je to filter vyrobený naskladaním niekoľkých tenkých kovových filmov medzi dve leštené sklenené tabule. Index lomu každého tenkého kovového filmu je odlišný, preto sa na každom kovovom filme opakovane odrážajú spektrálne čiary rôznych vlnových dĺžok svetelného zdroja osvetlenia. Niektoré spektrálne čiary určitých vlnových dĺžok sú zrušené deštruktívnou interferenciou, zatiaľ čo iné sú zosilnené aditívnou interferenciou a prechádzajú cez ňu. Výsledkom je filter s úzkym prenosovým spektrom a polovičnou šírkou píku iba 6-20 nm. Priepustnosť môže dosiahnuť 60% -70%.
