Základy mikroskopie s fázovým kontrastom
Mikroskop s fázovým kontrastom je špeciálny mikroskop, ktorý premieňa rozdiel optickej dráhy (tj fázový rozdiel) generovaný pri prechode svetla cez detaily priehľadných vzoriek na rozdiel intenzity svetla.
Keď svetlo prechádza cez relatívne priehľadnú vzorku, ani vlnová dĺžka (farba) ani amplitúda (jas) svetla sa výrazne nemení. Preto pri pozorovaní nezafarbených vzoriek (napríklad živých buniek) bežnou svetelnou mikroskopiou je často ťažké rozlíšiť ich morfológiu a vnútornú štruktúru. Avšak v dôsledku rozdielu v indexe lomu a hrúbke rôznych častí bunky, keď svetlo prechádza cez takúto vzorku, optická dráha priameho svetla a difraktovaného svetla bude odlišná. Keď sa optická vzdialenosť zväčšuje alebo zmenšuje, mení sa fáza zrýchlených alebo oneskorených svetelných vĺn (vytvára fázový rozdiel). Fázový rozdiel svetla nie je možné cítiť voľným okom, ale mikroskop s fázovým kontrastom môže využiť interferenčný jav svetla prostredníctvom špeciálneho zariadenia – prstencovej clony a fázovej platne, aby premenil fázový rozdiel svetla na rozdiel amplitúdy (svetlo a tmavé), ktoré môžu vnímať ľudské oči Slabé), takže pôvodné priehľadné predmety vykazujú zjavné rozdiely vo svetle a tieni a kontrast sa zvýši, aby sme mohli jasne pozorovať živé bunky a bunky v bunkách, ktoré nie sú viditeľné alebo zreteľne viditeľné pod bežnými svetelnými mikroskopmi a mikroskopmi v tmavom poli. určité jemné štruktúry.
Princíp zobrazovania mikroskopu s fázovým kontrastom: Počas mikroskopickej kontroly môže zdroj svetla prechádzať len cez priehľadný prstenec prstencovej clony a po prechode cez kondenzor sa zbieha do lúča. Stupeň vychýlenia (difrakcie). Obraz vytvorený priehľadným prstencom práve dopadá na zadnú ohniskovú rovinu šošovky objektívu a zhoduje sa s konjugovanou rovinou na fázovej doske. Preto neodchýlené priame svetlo prechádza konjugovanou rovinou, zatiaľ čo odchýlené difraktované svetlo prechádza cez kompenzačnú rovinu. V dôsledku rôznych vlastností konjugovaného povrchu a kompenzačného povrchu na fázovej doske vytvoria určitý fázový rozdiel a oslabia intenzitu svetla prechádzajúceho cez dve časti, a dve skupiny svetla sa budú zbiehať na rovnakom. optická dráha po konvergencii zadnej šošovky. Priame svetlo a difraktované svetlo vytvárajú interferenciu svetla a fázový rozdiel sa mení na rozdiel amplitúdy. Týmto spôsobom, keď sa kontroluje mikroskop s fázovým kontrastom, svetlo prechádzajúce cez bezfarebné priehľadné teleso premieňa fázový rozdiel, ktorý ľudské oko nedokáže rozlíšiť, na rozdiel amplitúd (rozdiel svetla a tmy), ktorý ľudské oko dokáže rozlíšiť.
