Spôsob výroby mikroskopických preparátov
Existujú tri spôsoby výroby mikroskopických preparátov:
1. Metóda rozmazania
Metóda roztierania je spôsob prípravy, pri ktorom sa materiál rovnomerne rozotrie na sklíčko.
Náterové materiály zahŕňajú jednobunkové organizmy, malé riasy, krv, bakteriálne kultúry, voľné tkanivá rastlín a živočíchov, hniezda spermií, prašníky atď.
Pri roztieraní je potrebné venovať pozornosť:
(1) Sklíčko musí byť čisté.
(2) Šmykľavka by mala byť držaná naplocho.
3) Náter musí byť jednotný. Kvapku poťahovacej kvapaliny naneste napravo od stredu podložného sklíčka a dobre rozotrite čepeľou pitevného noža alebo špáradla atď.
4) Povlak by mal byť tenký. Použite ďalšie sklíčko ako posúvač, jemne zatlačte sprava doľava pozdĺž povrchu sklíčka kvapkou aplikačného roztoku (uhol medzi dvoma sklíčkami by mal byť 30 stupňov až 45 stupňov) a naneste rovnomerne tenkú vrstvu.
5) Fixácia. Ak je potrebná fixácia, použite chemický fixátor alebo desikačnú (bakteriálnu) fixáciu.
6) Farbenie. Na baktérie použite metylénovú modrú a na krv Rachelinu škvrnu. Farbiaci roztok by mal pokrývať celý potiahnutý povrch.
7) Opláchnite. Nasať na savý papier alebo upiecť nasucho.
8) Utesnite fóliu. Na dlhodobé skladovanie použite kanadský stromový film.
2. Spôsob lisovania filmu
Metóda tlakového filmu je biologický materiál umiestnený medzi podložné sklíčko a kryciu fóliu, pri použití určitého tlaku sa tkanivové bunky roztlačia spôsobom prípravy.
(1) vziať materiál. Pozorovanie bunkového delenia, bunkového delenia by mali byť vybrané bujné, čerstvé tkanivové bunky ako materiály. Ako sú koreňové hroty, meristémové tkanivo hrotov stonky, bunky kostnej drene, prašníky (peľové materské bunky). Hniezdo spermií (spermatogónia) a tak ďalej.
(2) Fixácia. Fixáciu materiálu je možné určiť podľa potreby, ihneď po odbere materiálu pozorovaním tlakového filmu, nie je možné vykonať samostatné fixné ošetrenie (a farbenie synchrónne); materiál nie je ihneď po obhliadke, materiál je možné fixovať fixačným prostriedkom (spravidla liehovým fixačným prostriedkom). Fixované 2 ~ 24 hodín (v závislosti od materiálu) po umytí 95% etanolom, konzervované v 70% etanole, pohotovostný režim.
(3) Disociácia. Bunky nie sú ľahké dispergovať materiál hydrolyzačným separačným roztokom (ako je 1N HCl alebo roztok kyseliny chlorovodíkovej a alkoholu), všeobecné ošetrenie 6 ~ 20 minút, po disociácii a opláchnutí vodou pred farbením.
(4) Farbenie. Existuje mnoho druhov škvŕn. Pozorovanie chromozómov sa bežne používa na farbenie roztokom na farbenie octanom purpurovým.
(5) Lisovanie filmu. Umiestnite materiál na sklíčko, pridajte kvapku vody alebo farbiaceho roztoku, prikryte krycie sklíčko a jemne sklíčko zatlačte palcom.
(6) Pozorovanie. Po stlačení fólie je možné ju pozorovať pod mikroskopom.
