Výhody a nevýhody multifotónovej laserovej skenovacej mikroskopie
Multi-fotónová laserová skenovacia mikroskopia je experimentálna metóda založená na technológii laserového skenovacieho mikroskopu, ktorá poskytuje viac **optických možností rezov v 3D pozorovaní. Metóda multifotónovej fluorescenčnej excitácie využíva dlhé vlnové dĺžky červeného alebo blízkeho infračerveného svetla na získanie fluorescenčných obrazov vzoriek s vysokým rozlíšením s minimálnym zabíjaním aktívnych vzoriek, vďaka čomu je vhodná na zobrazovanie živých buniek, najmä hrubých živých tkanív, ako sú mozgové rezy, embryá, atď. celé orgány a dokonca celé organizmy.
Výhody sú nasledovné:
1, použitie červeného svetla alebo excitácie infračerveného svetla, rozptyl svetla je malý(rozptyl zmalýčastice a vlnová dĺžka štvrtej mocniny obráteného pomeru).
2, nevyžaduje dierku, môže zbierať viac rozptýlených fotónov zo zobrazovacieho prierezu.
3, dierka nedokáže rozlíšiť medzi rozptýlenými fotónmi emitovanými oblasťou mimo zaostrenia alebo ohniskovou oblasťou, viacfotónový pomer signálu k šumu v hlbokom zobrazovaní je dobrý.
4, jednofotónová excitácia ultrafialového alebo viditeľného svetla použitého v lúči na dosiahnutie ohniskovej roviny predtým, ako je vzorka ľahko absorbovaná a zoslabená, nie je ľahké hlboká excitácia.
5, pri pozorovaní biologickým mikroskopom * prvoradým hľadiskom je nepoškodzovať aktívny stav samotného organizmu, udržiavať koncentráciu vody, iónov, cirkuláciu kyslíka a živín. Pri príležitostiach pozorovania svetla musí tepelná aj fotónová energia zostať v bunke bez poškodenia množstva ožiarenia, svetelnej energie.
6, multi-fotónový mikroskop má tiež mnoho výhod. Ako je trojrozmerné rozlíšenie, hĺbka vniknutia, účinnosť rozptylu, svetlo pozadia, pomer signálu k šumu, ovládanie atď., Existujú predchádzajúce laserové mikroskopy, ktoré nemajú alebo majú neporovnateľné vlastnosti.
Viacfotónový konfokálny laserový skenovací mikroskop bol rozšírený do rôznych oblastí výskumu a aplikácií. Je schopný trojrozmerného nedeštruktívneho pozorovania vzoriek v ich prirodzenom stave a môže zlepšiť rozlíšenie a pomer signálu k šumu systému. Pomocou zmeny vlastností materiálu po viacfotónovej excitácii je možné dosiahnuť aj trojrozmerné výškové ukladanie dát a trojrozmernú mikrovýrobu v ľubovoľnom smere, čo má vysokú aplikačnú hodnotu. Dá sa veriť, že s ďalším vývojom strojov, materiálov, laserovej technológie a ďalších technológií súvisiacich s multifotónovou konfokálnou mikroskopiou bude viacfotónový konfokálny laserový skenovací mikroskop väčší rozvoj a širšie uplatnenie.
Nevýhody sú nasledovné:
1, iba fluorescenčné zobrazovanie.
2, ak vzorka obsahuje chromofóry, ktoré môžu absorbovať excitačné svetlo, ako naprpigmenty, vzorkamôže dôjsť k tepelnému poškodeniu.
3 je rozlíšenie mierne znížené, hocidá sa zlepšiť súčasným použitím konfokálnej apertúry, aledôjde k strate signálu.
4. Náklady na multifotónovú skenovaciu mikroskopiu sú vysoké kvôli obmedzeniu drahých ultrarýchlych laserov.
