Správne použitie inverznej fluorescenčnej mikroskopie
Invertovaný fluorescenčný mikroskop je multifunkčný mikroskop používaný v oblasti špičkového biologického vedeckého výskumu. Jeho štruktúra je zložitá a drahá. Preto, aby si absolventi medicíny správne osvojili fungovanie a štandardy používania invertovaného fluorescenčného mikroskopu, učitelia musia najprv naučiť základné znalosti o invertovanom fluorescenčnom mikroskope, kým predvedú skutočnú činnosť invertovaného fluorescenčného mikroskopu. Mali by predstaviť štruktúru, princíp, funkciu a základné metódy použitia invertovaného fluorescenčného mikroskopu a následne demonštrovať rôzne funkcie pre rôzne vzorky v špecifických operáciách použitia, čím by sa postupne normalizovala prevádzka a použitie invertovaného fluorescenčného mikroskopu pre študentov doktorandského štúdia medicíny.
1. Správne používanie vizuálneho pozorovania. Jednou z funkcií invertovaného fluorescenčného mikroskopu je pozorovanie v jasnom zornom poli. Jeho základným princípom je dosiahnuť zobrazenie na jasnom pozadí na základe rozdielnej absorpcie svetla každej časti preparátu po osvetlení svetlom. Je vhodný najmä na pozorovanie zafarbených alebo zafarbených buniek, plátkov tkaniva a iných vzoriek.
2. Správne používanie diferenciálneho pozorovania. Druhou funkciou invertovaného fluorescenčného mikroskopu je pozorovanie fázového rozdielu. Jeho základným princípom je previesť rozdiel optickej dráhy rôznych častí vzorky na rozdiel amplitúd a pozorovať objektívom s fázovým rozdielom s fázovou doskou a reflektorom s kruhovou apertúrou. Je vhodný hlavne na pozorovanie živých buniek alebo nezafarbených plátkov tkaniva. V procese experimentálneho vyučovania je okrem správneho vedenia študentov doktorandského štúdia medicíny k dodržiavaniu základných operačných metód pozorovania fázového rozdielu dôležitejšie viesť ich k pochopeniu a zvládnutiu vzoriek pomocou pozorovania fázového rozdielu. Pre nich je najčastejšie používanou metódou v budúcom vedeckom výskume mikroskopické pozorovanie kultivovaných buniek. Po prvé, na výber bunkového vybavenia sa vo všeobecnosti odporúča používať kultivačné misky, taniere a fľaše vyrobené zo skla a plastov. Väčšinou sú bezfarebné a priehľadné a možno ich priamo pozorovať pod inverzným fluorescenčným mikroskopom bez potreby vylievať bunkovú tekutinu alebo podstupovať iné úpravy. Po druhé, počas mikroskopického pozorovania neotvárajte veko zariadenia náhodne, aby ste predišli kontaminácii buniek. A nakoniec, pre operátorov by mali nosiť rukavice, masky a biele plášte, aby nielen chránili svoje zdravie, ale aj zabránili kontaminácii buniek.
3. Správne použitie pozorovania fluorescencie. Treťou funkciou invertovaného fluorescenčného mikroskopu je pozorovanie fluorescencie. Jeho základným princípom je použitie excitačného svetla na excitáciu vzorky, aby sa vytvorila fluorescencia, čím sa dosiahne pozorovanie tvaru a polohy vzorky. Je vhodný hlavne na pozorovanie fluorescenčne značených vzoriek. Fluorescenčné pozorovanie je dôležitou funkciou inverznej fluorescenčnej mikroskopie s drahým príslušenstvom a špeciálnym použitím. Aby študenti medicíny správne zvládli prevádzkové normy fluorescenčného pozorovania, učitelia ich nielen učia základné operačné metódy, ale čo je dôležitejšie, učia ich jedinečnosti. Po prvé, pri príprave vzorky by mal byť povrch podložného sklíčka a krycieho sklíčka hladký a mal by mať primeranú hrúbku (sklíčko by malo byť medzi 0,8 mm a 1,2 mm a krycie sklíčko by malo byť približne {{5 }}.17 mm); Vzorka by mala mať vhodnú hrúbku, pričom by sa malo zabrániť prekrývaniu buniek alebo maskovaniu nečistôt; Tesniaci prostriedok by mal používať rovnakú zmes glycerolu a karbonátového pufra (0,5 mol/l pH 9.0-9,5). Po druhé, pred fluorescenčným pozorovaním by sa mali vypnúť svetlá v miestnosti a biele svetlo inverzného fluorescenčného mikroskopu, aby sa zabezpečilo, že sú v prostredí tmavej miestnosti. Nakoniec, pri fluorescenčnom pozorovaní by mal byť čas pozorovania prísne kontrolovaný, vo všeobecnosti 1-2 hodín za čas, inak fluorescencia klesne a zmizne; Pri nastavovaní svetelného zdroja by ste mali nosiť ochranné okuliare, aby sa zabránilo poškodeniu okuliarov UV žiarením.
4. Správne používanie snímania obrazu. Vo vedeckom výskume sa vyžaduje nielen to, aby invertovaná fluorescenčná mikroskopia mohla dosiahnuť viacnásobné pozorovania, ale aj to, aby inverzná fluorescenčná mikroskopia mohla dosiahnuť zachytenie obrazu. Systém invertovaného fluorescenčného mikroskopu kombinuje optický mikroskop s počítačom prostredníctvom fotoelektrickej konverzie, čo umožňuje nielen mikroskopické pozorovanie na okuláre, ale aj pozorovanie dynamického obrazu v reálnom čase, jeho úpravu a ukladanie v počítači.
