Rozdiel medzi bežnou optickou mikroskopiou a fluorescenčnou mikroskopiou
Optický mikroskop: Je to optický prístroj, ktorý využíva optické princípy na zväčšovanie a zobrazenie malých predmetov, ktoré ľudské oko nedokáže rozlíšiť, s cieľom extrahovať mikroštrukturálne informácie pre ľudí.
Fluorescenčný mikroskop: Fluorescenčný mikroskop používa ultrafialové svetlo ako zdroj svetla na osvetlenie testovaného objektu, čo spôsobí, že vyžaruje fluorescenciu, a potom pozoruje tvar a polohu objektu pod mikroskopom. Fluorescenčná mikroskopia sa používa na štúdium absorpcie, transportu, distribúcie a lokalizácie intracelulárnych látok. Niektoré látky v bunkách, ako napríklad chlorofyl, môžu po vystavení ultrafialovému žiareniu vyžarovať fluorescenciu; Hoci niektoré látky samotné nemôžu vyžarovať fluorescenciu, môžu vyžarovať fluorescenciu aj po zafarbení fluorescenčnými farbivami alebo fluorescenčnými protilátkami a ožiarení ultrafialovým svetlom. Fluorescenčná mikroskopia je jedným z nástrojov kvalitatívneho a kvantitatívneho výskumu týchto látok.
Optický mikroskop sa vo všeobecnosti skladá zo stolíka, osvetľovacieho systému bodového svetla, objektívu, okuláru a zaostrovacieho mechanizmu. Systém bodového osvetlenia môže získať rôzne metódy pozorovania, ako sú tmavé body na svetlom pozadí (známe ako svetlé pole osvetlenie) alebo svetlé body na tmavom pozadí (známe ako osvetlenie tmavého poľa) zmenou spôsobu osvetlenia, aby bolo možné lepšie objavovať a pozorovať jemné štruktúry v rôznych situáciách.
Fluorescenčná mikroskopia a bežná mikroskopia majú tieto rozdiely:
1. Spôsob osvetlenia je zvyčajne kvapkového typu, pri ktorom sa svetelný zdroj premieta na vzorku cez šošovku objektívu;
2. Zdrojom svetla je ultrafialové svetlo, s kratšou vlnovou dĺžkou a vyšším rozlíšením ako bežné mikroskopy;
3. Existujú dva špeciálne filtre, jeden pred zdrojom svetla sa používa na odfiltrovanie viditeľného svetla a jeden medzi okulárom a šošovkou objektívu sa používa na odfiltrovanie ultrafialového svetla na ochranu ľudského oka.
Fluorescenčná mikroskopia je tiež typ optického mikroskopu, pričom hlavným rozdielom sú rozdielne vlnové dĺžky excitácie medzi nimi. To určuje rozdiely v štruktúre a použití medzi fluorescenčnými mikroskopmi a bežnými optickými mikroskopmi.
Fluorescenčná mikroskopia je základným nástrojom imunofluorescenčnej cytochémie. Skladá sa z hlavných komponentov, ako je zdroj svetla, systém filtračných dosiek a optický systém. Ide o použitie určitej vlnovej dĺžky svetla na excitáciu preparátu a vyžarovanie fluorescencie, ktorá sa zväčšuje cez systém objektívu a okuláru na pozorovanie fluorescenčného obrazu preparátu.
