Spôsob prípravy mikroskopických preparátov
1. Metóda rozmazania
Metóda roztierania je spôsob prípravy sklíčok rovnomerným nanášaním materiálov na ne.
Náterové materiály zahŕňajú jednobunkové organizmy, malé riasy, krv, bakteriálne kultivačné médiá, voľné tkanivá zvierat a rastlín, semenníky, prašníky atď.
Pri roztieraní je potrebné venovať pozornosť:
(1) Podložné sklo sa musí vyčistiť.
(2) Podložné sklo by malo byť ploché.
(3) Náter musí byť jednotný. Kvapku naneste do pravého stredu podložného skla a rovnomerne rozotrite pomocou disekčnej čepele alebo špáradla.
(4) Povlak by mal byť tenký. Pomocou iného podložného sklíčka ako podložného sklíčka jemne zatlačte sprava doľava pozdĺž povrchu podložného sklíčka s nanesenou tekutinou (uhol medzi dvoma podložnými sklíčkami by mal byť 30 stupňov až 45 stupňov) a naneste rovnomernú tenkú vrstvu.
(5) Pevné. Ak je potrebná fixácia, možno na fixáciu použiť chemické fixatíva alebo metódy sušenia (baktérie).
(6) Farbenie. Baktérie používajú metylénovú modrú a krv používa Wrightov farbiaci roztok. Farbiaci roztok by mal pokrývať celý povrch náteru.
(7) Opláchnite. Na absorbovanie alebo sušenie použite savý papier.
(8) Utesnite fóliu. Dlhodobá konzervácia pomocou kanadského stromového filmu.
2. Spôsob lisovania tabliet
Kompresná metóda je metóda krájania biologických materiálov ich umiestnením medzi podložné sklo a kryt, pričom sa aplikuje určitý tlak na rozptýlenie tkanivových buniek.
Všeobecný proces metódy lisovania tabliet:
(1) Výber materiálu. Na pozorovanie bunkového delenia by sa ako materiály mali vybrať bunky čerstvého tkaniva s intenzívnym delením buniek. Ako je špička koreňa, meristém na špičke stonky, bunky kostnej drene, prašníky (peľové materské bunky). Hniezda spermií (spermatocyty) atď.
(2) Pevné. Fixáciu materiálu je možné určiť podľa potreby a vzorka by sa mala okamžite stlačiť a pozorovať. Nie je potrebné vykonávať samostatné fixačné ošetrenie (synchrónne s farbením); Ak sa materiál nekontroluje ihneď po odbere vzoriek, môže byť fixovaný fixačným prostriedkom (zvyčajne alkoholovým fixátorom kyseliny octovej). Po fixácii 2-24 hodín (v závislosti od materiálu) opláchnite 95% etanolom a uskladnite v 70% etanole na neskoršie použitie.
(3) Oddelenie. Materiály, ktoré nie sú ľahko dispergovateľné bunkami, by mali byť ošetrené hydrolyzačným separačným roztokom (ako je 1N HCl alebo sperma kyseliny chlorovodíkovej) počas 6-20 minút. Po disociácii by sa mali pred farbením opláchnuť vodou.
(4) Farbenie. Existuje mnoho druhov farbív. Chromozómy sa bežne farbia purpurovým farbiacim roztokom kyseliny octovej.
(5) Stlačte tablet. Materiál položte na podložné sklíčko, pridajte kvapku vody alebo roztoku farbiva, prikryte sklíčko krytom a jemne ho zatlačte palcom.
(6) Dodržujte. Po stlačení sa dá pozorovať pod mikroskopom.
