Štruktúra a hlavné komponenty fluorescenčného mikroskopu
(1) Svetelný zdroj
V súčasnosti sa ako zdroj svetla bežne používa 200W ultravysokotlaková ortuťová výbojka. Je vyrobený z kremenného skla, v strede má guľovitý tvar a vo vnútri je naplnený určitým množstvom ortuti. Počas prevádzky výboj medzi dvoma elektródami spôsobuje odparovanie ortuti a tlak vo vnútri gule sa rýchlo zvyšuje. Keď sa ortuť úplne vyparí, môže dosiahnuť 50-70 štandardný atmosférický tlak, čo vo všeobecnosti trvá asi 5-15 minút. Luminiscencia ultravysokotlakových ortuťových výbojok je výsledkom výboja medzi elektródami, ktorý neustále disociuje a redukuje molekuly ortuti a emituje fotóny. Vyžaruje silné ultrafialové a modrofialové svetlo, ktoré je dostatočné na excitáciu rôznych fluorescenčných látok, preto sa široko používa vo fluorescenčných mikroskopoch.
Ultra vysokotlakové ortuťové výbojky tiež vyžarujú veľké množstvo tepelnej energie. Preto musí mať miestnosť s lampami dobré podmienky na odvod tepla a teplota pracovného prostredia by nemala byť príliš vysoká.
Nová ultravysokotlaková ortuťová výbojka nevyžaduje vysoké napätie na zapálenie v počiatočnom štádiu používania. Po určitom čase používania je potrebné spustiť s vysokým napätím (asi 15000V). Po spustení sa pracovné napätie vo všeobecnosti udržiava na 50-60V a pracovný prúd je približne 4A. Priemerná životnosť 200W ultravysokotlakovej ortuťovej výbojky je približne 200 hodín pri každom použití 2 hodiny. Čím kratší čas prevádzky, tým kratšia životnosť. Ak sa prevádzkuje iba 20 minút raz, životnosť sa zníži o 50 %. Preto sa snažte pri používaní minimalizovať počet štartov. Svetelná účinnosť žiarovky sa počas používania postupne znižuje. Po zhasnutí kontrolky musí pred reštartovaním počkať na vychladnutie. Po rozsvietení žiarovky by sa nemala okamžite vypínať, aby nedošlo k neúplnému odpareniu ortuti a poškodeniu elektródy. Vo všeobecnosti je potrebné počkať 15 minút. Kvôli vysokému tlaku a silnému ultrafialovému žiareniu ultravysokotlakovej ortuťovej výbojky musí byť žiarovka pred zapálením umiestnená v komore lampy, aby sa zabránilo poraneniu očí a výbuchu počas prevádzky.
Obvod ultravysokotlakovej ortuťovej výbojky (100W alebo 200W) svetelného zdroja a jeho komponentov vrátane transformácie napätia, potlačenia prúdu a spustenia. V miestnosti s lampami je systém na nastavenie stredu svetla žiarovky s hliníkovým konkávnym reflektorom inštalovaným za žiarovkou a šošovkou na zber svetla inštalovanou vpredu.
Domáca ultravysokotlaková ortuťová výbojka GCQ-200 má dobrý výkon a môže nahradiť dovážané žiarovky, ako je HBO-200, s priemernou životnosťou viac ako 200 hodín a relatívne nízkou cenou.
Jednoduché a prenosné zariadenie s brómovolfrámovým fluorescenčným zdrojom svetla s vysokou farebnou teplotou vyvinuté v Číne, s malým objemom, nízkou hmotnosťou, nízkym výkonom, dvojitým použitím AC a DC (so vstavaným jednosmerným napájaním), ľahko sa prenáša a pohodlne sa používa , bol povýšený a aplikovaný.
(2) Systém filtrovania farieb
Systém farebných filtrov je dôležitou súčasťou fluorescenčného mikroskopu, ktorý pozostáva z excitačnej filtračnej platne a kompresnej filtračnej platne. Model filtračnej dosky je medzi výrobcami často nekonzistentný. Filtračné dosky sú vo všeobecnosti pomenované podľa základného farebného tónu, pričom prvé písmeno predstavuje farebný tón, druhé písmeno predstavuje sklo a číslo predstavuje charakteristiku modelu. Mikroskop Olympus
(3) Objektív
Môžu sa použiť rôzne šošovky objektívu, ale použitie achromatických šošoviek objektívu je vhodné pre fluorescenciu kvôli ich extrémne nízkej vlastnej fluorescencii a priepustnosti (rozsah vlnových dĺžok). Vzhľadom na skutočnosť, že fluorescenčný jas obrazu v zornom poli mikroskopu je priamo úmerný druhej mocnine pomeru apertúry šošovky objektívu a nepriamo úmerný jej zväčšeniu, aby sa zlepšila jasnosť fluorescenčného obrazu, šošovka objektívu s väčším pomerom clony. Najmä pri veľkom zväčšení je jeho vplyv veľmi výrazný. Preto by sa pri preparátoch s nedostatočnou fluorescenciou mala použiť šošovka objektívu s vysokou apertúrou v kombinácii s čo najnižším okulárom (4 x, 5 x, 6,3 x atď.).
(4) Reflexné zrkadlo
Reflexná vrstva reflektora je vo všeobecnosti pokovovaná hliníkom, pretože hliník absorbuje menej ultrafialového a viditeľného svetla v modrofialovej oblasti s odrazom viac ako 90 %, zatiaľ čo striebro odráža iba 70 %; Vo všeobecnosti sa používajú ploché reflektory.
(5) Zrkadlo reflektora
Koncentrátor navrhnutý a vyrobený špeciálne pre fluorescenčnú mikroskopiu je vyrobený z kremenného skla alebo iného skla, ktoré prepúšťa ultrafialové svetlo. Existujú dva typy spotterov tmavého poľa s odlišným zorným poľom. K dispozícii je tiež diferenciálny koncentrátor fluorescencie.
(6) Zariadenie na padajúce svetlo
Nový typ zariadenia s dopadajúcim svetlom odráža časti s kratšími vlnovými dĺžkami (ultrafialové a purpurovo modré) zo zdroja svetla do filtra interferenčného spektrofotometra vďaka vlastnostiam povlaku na filtri. Keď je filter otočený k zdroju svetla pod uhlom 45 stupňov. Pri naklonení smeruje vertikálne smerom k šošovke objektívu a smeruje k preparátu cez šošovku objektívu, čo spôsobuje excitáciu preparátu. V tomto bode objektív priamo funguje ako kondenzor. Zároveň sú dlhé časti filtra (zelená, žltá, červená atď.) pre filter priehľadné, takže sa neodrážajú v smere objektívu. Filter funguje ako excitačná filtračná platňa, a pretože fluorescencia vzorky je v oblasti viditeľného svetla s dlhou vlnovou dĺžkou, možno ju pozorovať cez filter a dosiahnuť objektív. Jas fluorescenčného obrazu sa zvyšuje so zväčšením a je silnejší ako zdroj prechádzajúceho svetla pri veľkom zväčšení. Okrem svojej funkcie ako zdroj transmisívneho svetla je vhodnejší na priame pozorovanie nepriehľadných a polopriehľadných vzoriek, ako sú hrubé platne, filtračné membrány, kolónie, vzorky tkanivových kultúr a pod. používať zariadenia s padajúcim svetlom, známe ako fluorescenčné mikroskopy s padajúcim svetlom.
