Existujú dva typy fluorescenčných mikroskopov na základe ich svetelných dráh.
1. Transmisný fluorescenčný mikroskop: Zdroj excitačného svetla prechádza cez materiál vzorky cez kondenzátor, aby vybudil fluorescenciu. Bežne sa používa kolektor tmavého poľa alebo sa môže použiť obyčajný kolektor a reflektor je nastavený tak, aby odvádzal a bočne vyžaroval excitačné svetlo na vzorku. Ide o starší fluorescenčný mikroskop. Výhodou je, že fluorescencia je silná pri malom zväčšení, nevýhodou však je, že fluorescencia s rastúcim zväčšením slabne. Preto je lepšie pozorovať väčšie vzorky materiálov.
2. Epi-fluorescenčný mikroskop je nový typ fluorescenčného mikroskopu vyvinutý v modernej dobe. Rozdiel od vyššie uvedeného je v tom, že excitačné svetlo dopadá zo šošovky objektívu na povrch vzorky, to znamená, že rovnaká šošovka objektívu sa používa ako osvetľovací kondenzor a šošovka objektívu na zber fluorescencie. K optickej dráhe je potrebné pridať dvojfarebný rozdeľovač lúčov, čo je 45% s optickým uránom. Uhol, excitačné svetlo sa odráža do šošovky objektívu a sústreďuje sa na vzorku. Fluorescencia generovaná vzorkou a excitačné svetlo odrazené povrchom šošovky objektívu a povrchom krycieho skla vstupujú do šošovky objektívu súčasne a vracajú sa do dichromatického rozdeľovača lúčov, takže excitačné svetlo je oddelené od fluorescencie, zvyšková excitácia svetlo je potom absorbované blokovacím filtrom. Ak použijete rôzne kombinované vložky excitačného filtra/dvojfarebného rozdeľovača lúča/blokovacieho filtra, môžete splniť potreby rôznych produktov fluorescenčnej reakcie. Výhodou tohto typu fluorescenčného mikroskopu je, že zorné pole je rovnomerne osvetlené, obraz je jasný a čím väčšie zväčšenie, tým silnejšia je fluorescencia.
(2) Ako používať fluorescenčný mikroskop.
1. Zapnite zdroj svetla a ultravysokotlaková ortuťová výbojka sa musí niekoľko minút zahriať, aby dosiahla svoj najjasnejší bod.
2. Transmisné fluorescenčné mikroskopy vyžadujú, aby bol medzi zdroj svetla a kondenzor nainštalovaný požadovaný excitačný filter a za šošovku objektívu bol nainštalovaný zodpovedajúci blokovací filter. Epifluorescenčné mikroskopy potrebujú vložiť požadovaný excitačný filter/dvojfarebný rozdeľovač lúčov/blokovací filter do štrbiny svetelnej dráhy.
3. Na pozorovanie použite mikroskop s malým zväčšením a upravte stred svetelného zdroja podľa nastavovacích zariadení rôznych modelov fluorescenčných mikroskopov tak, aby sa nachádzal v strede celého osvetľovacieho bodu.
4. Umiestnite kus vzorky a zaostrite na pozorovanie. Pri používaní dávajte pozor: Nesledujte filter priamo očami, aby ste predišli poškodeniu zraku; pri pozorovaní preparátu olejovou šošovkou musíte použiť špeciálnu nefluorescenčnú olejovú šošovku; vysokotlakovú ortuťovú výbojku nie je možné ihneď po vypnutí znovu otvoriť. Po 5 minútach je možné ju znova spustiť, inak bude nestabilná a ovplyvní životnosť ortuťovej výbojky.
(3) Pozorujte pod fluorescenčným mikroskopom na vyučovacej platforme s použitím filtra modrofialového svetla. Vidno, že pasáž je o. V bunkách zafarbených 01% akridínovým oranžovým fluorescenčným farbivom sú jadro a cytoplazma excitované, aby vytvorili dve rôzne farby fluorescencie (tmavozelenú a oranžovo-červenú).
