Tri typy mikroskopického pozorovania
I. Svetlé pole BF (Svetlé pole BF)
Bright field BF je známy spôsob mikroskopie, ktorý je široko používaný v patológii a testovaní na pozorovanie zafarbených rezov a všetky mikroskopy sú schopné vykonávať túto funkciu.
Svetlé pole
II. Tmavé pole DF (Dark field DF)
Dark field DF je vlastne osvetlenie tmavého poľa. Od svetlého poľa sa líši v tom, že nepozoruje priamo osvetlené svetlo, ale svetlo odrazené alebo odchýlené od skúmaného objektu. Výsledkom je, že zorné pole sa stáva tmavým pozadím, zatiaľ čo skúmaný objekt sa javí ako jasný obraz.
Princíp tmavého zorného poľa je založený na Tyndallovom jave v optike, prach v prípade silného svetla cez priame svetlo, ľudské oko nemožno pozorovať, je to kvôli silnému svetlu okolo príčiny. Ak je svetlo nasmerované šikmo na ňu, zdá sa, že častice sa odrazom svetla zväčšujú a stávajú sa viditeľnými pre ľudské oko.
Špeciálnym príslušenstvom potrebným na pozorovanie v tmavom poli je pozorovací ďalekohľad v tmavom poli. Vyznačuje sa tým, že svetelný lúč neprechádza cez skúmaný objekt zdola nahor, ale mení dráhu svetla tak, aby smerovala šikmo k skúmanému objektu, takže osvetľujúce svetlo nevstupuje priamo do objektu. šošovkou objektívu a jasný obraz sa vytvorí použitím odrazeného alebo ohýbaného svetla od povrchu skúmaného objektu. Rozlíšenie pozorovania v tmavom poli je oveľa vyššie ako pri pozorovaní vo svetlom poli, * až do 0.02-0.004
Darkfield
III. Fázový kontrast PH
Vo vývoji optickej mikroskopie je úspešný vynález fázového kontrastu PH dôležitým úspechom v modernej mikroskopickej technológii. Ako vieme, ľudské oko dokáže rozlíšiť iba vlnovú dĺžku (farbu) a amplitúdu (jas) svetelných vĺn, pri bezfarebných a jasných biologických vzorkách sa pri prechode svetla vlnová dĺžka a amplitúda príliš nemenia a je ťažké na pozorovanie preparátu v pozorovaní vo svetlom poli.
Mikroskop s fázovým kontrastom využíva na mikroskopické vyšetrenie rozdiel rozsahu svetla skúmaného objektu, to znamená, že efektívne využíva interferenčný jav svetla na zmenu nerozlíšiteľného fázového rozdielu ľudského oka na rozlíšiteľný rozdiel amplitúd, a to aj bezfarebný a priehľadný. látky môžu byť jasne viditeľné. To značne uľahčuje pozorovanie živých buniek, takže mikroskopia s fázovým kontrastom je široko používaná v inverzných mikroskopoch.
Základným princípom mikroskopie s fázovým kontrastom je, že rozdiel v optickom rozsahu viditeľného svetla prechádzajúceho cez vzorku sa mení na rozdiel v amplitúde, čím sa zvyšuje kontrast medzi rôznymi štruktúrami a sú viditeľné. Svetlo sa láme cez vzorku a odchyľuje sa od pôvodnej svetelnej dráhy, pričom je oneskorené o 1/4λ (vlnová dĺžka). Ak sa 1/4λ opäť zvýši alebo zníži, rozdiel optického rozsahu sa stane 1/2λ a interferencia medzi dvoma lúčmi fotosyntézy sa zosilní po interferencii osí dvoch lúčov a amplitúda sa zvýši alebo zníži, teda zlepšenie kontrastu. V štruktúre má mikroskop s fázovým kontrastom dve špeciálne vlastnosti, ktoré sa líšia od bežného optického mikroskopu:
1. prstencová clona (anulardiaphragm) je umiestnená medzi svetelným zdrojom a kondenzorom, úlohou je prinútiť svetlo cez kondenzor vytvoriť dutý kužeľ svetla so zameraním na preparát.
2. fázová platňa (prstencová fáza) v šošovke objektívu potiahnutá fázovou platňou fluoridu horečnatého, priame alebo ohybové svetlo môže byť oneskorené o fázu 1/4λ. Sú dva druhy:
1. Fázová doska: priame svetlo oneskorené o 1/4 λ, dve skupiny svetelných vĺn koaxiálne pridanie svetelných vĺn, zvýšenie amplitúdy, štruktúra vzorky ako okolité médium je jasnejšia, vytvorenie jasného kontrastu (alebo negatívneho kontrastu) .
2.B fázová platňa: difraktované svetlo sa oneskorí o 1/4 λ, dve skupiny svetelných vĺn sa po zlúčení osi svetelnej vlny zmenšia, amplitúda sa zmenšuje, vzniká tmavý kontrast (alebo kladný kontrast). ), štruktúra je tmavšia ako okolité médium.
