Špeciálna štruktúra fluorescenčného mikroskopu zahŕňa:
(I) Systém farebných filtrov
Farebný filter je dôležitou súčasťou fluorescenčného mikroskopu, jeho základné komponenty tvoria filter excitačného svetla (prvý bariérový filter), filter emisného svetla (druhý bariérový filter) a zloženie napoly priehľadné a napoly proti filtru (zrkadlo rozdeľujúce lúč). . Rôzni výrobcovia modelov farebných filtrov, názov často nie je jednotný.
1. Filter excitačného svetla a filter emisného svetla: podľa zdroja svetla a charakteristík fluorochrómu si zvyčajne vyberte nasledujúce tri typy zhody, aby ste poskytli určitý rozsah vlnových dĺžok excitačného svetla a aby vzorka excitovala fluorescenciu cez okulár na zobrazovanie.
UV excitácia: Filter excitačného svetla umožňuje prenos UV svetla a blokuje prechod viditeľného svetla nad 400nm. Príslušný emisný filter umožňuje prechod modrého svetla, ktoré sa v zornom poli javí ako modré, napr. pri farbení DAPI.
Excitácia modrého svetla: Filter excitačného svetla umožňuje prechod modrého svetla a blokuje ostatné vlnové dĺžky svetla. Príslušný emisný filter umožňuje prechod zeleného svetla, napr. pre markery farbenia GFP.
Zelená excitácia: excitačný filter prepúšťa zelené svetlo a blokuje ostatné vlnové dĺžky. Príslušný emisný filter zvyčajne umožňuje prechod červeného svetla, napr. farbenie rodamínom.
2. Polopriehľadný a poloodrazový filter: jeho úlohou je úplne blokovať budenie svetla cez odraz; a cez zodpovedajúci rozsah vlnových dĺžok emitovaného svetla. Jeho model a excitácia svetelných filtrov a emisia svetelných filtrov tomu zodpovedajú.
(B) šošovka objektívu a okulár
Je možné použiť rôzne šošovky objektívu, ale * dobrý výber symetrických achromatických šošoviek objektívu, pretože ich autofluorescencia je veľmi malá a vlastnosti prenosu svetla (rozsah vlnových dĺžok) sú vhodné pre fluorescenciu. Keďže fluorescenčný jas obrazu v zornom poli mikroskopu je úmerný druhej mocnine úsťovej frekvencie objektívu a nepriamo úmerný jeho zväčšeniu, tak na zlepšenie jasu fluorescenčného obrazu by mal objektív s veľkou úsťovou frekvenciou byť použitý. Najmä pre fluorescenciu nie je dostatočne silná vzorka, mali by ste použiť veľkú ústnu frekvenciu, objektív s vysokou priepustnosťou svetla, s čo najnižším okulárom.
C) iné optické zariadenia
Reflektor, jeho reflexná vrstva je vo všeobecnosti pokovovaná hliníkom, pretože hliník na ultrafialovom a viditeľnom svetle absorbuje modrofialovú oblasť menej, odráža až 90% alebo viac (zatiaľ čo odrazivosť striebra je len 70%). Vo všeobecnosti sa používajú ploché reflektory. Reflektorové zrkadlo, navrhnuté a vyrobené špeciálne pre fluorescenčné mikroskopické reflektorové zrkadlo vyrobené z kremenného skla alebo iného UV priehľadného skla. Zariadenie s padajúcim svetlom, ktoré je okrem funkcie zdroja prenášaného svetla vhodnejšie pre nepriehľadné a priesvitné vzorky, ako je hrubý film, filtračná membrána, kolónie, tkanivové kultúry a iné vzorky na priame pozorovanie. V posledných rokoch došlo k vývoju nového typu fluorescenčného mikroskopu s použitím zariadenia s padajúcim svetlom, nazývaného padajúci fluorescenčný mikroskop.
(D) svetelný zdroj
V súčasnosti sa ako zdroj svetla používa 50 alebo 100W vysokotlaková ortuťová výbojka. Práca pri výboji dvoch elektród, spôsobená odparovaním ortuti, tlak vzduchu v guľôčke rýchlo stúpa (tento proces zvyčajne trvá asi 5 ~ 15 minút) a v procese emisie svetelných kvant je vlnová dĺžka uvoľneného svetla dostatočná na excitáciu. všetky typy fluorescenčných látok, preto sa bežne používa fluorescenčná mikroskopia.
Ortuťové výbojky majú relatívne krátku životnosť, zvyčajne 200 hodín, a v reakcii na toto obmedzenie životnosti sa v posledných rokoch široko používa nový fluorescenčný svetelný zdroj X-Cite pre svoju dlhú životnosť lampy 2000 hodín a flexibilné použitie. - nevyžaduje sa žiadne predhrievanie a je pripravený na použitie hneď po vybalení z krabice.
