Aké špecifikácie vzoriek sú potrebné pre svetelnú mikroskopiu?
V procese prípravy vzorky optického mikroskopu je hrúbka rezu vzorky medzi 2-25 um; hrúbka rezu elektrónového mikroskopu je do 50-100 nm (okrem vysokonapäťového elektrónového mikroskopu, ktorého hrúbka vzorky môže dosiahnuť 1 um), takže použitá metóda rezu nie je úplne rovnaká.
Nosičom rezu optického mikroskopu je sklíčko, nosičom rezu elektrónového mikroskopu je mriežka.
Z hľadiska fixácie sú plátky optického mikroskopu fixované zloženým fixátorom, zatiaľ čo plátky elektrónového mikroskopu sú fixované opakovane jediným fixátorom.
Z hľadiska farbenia je farbenie optických vzoriek pomerne jednoduché. Podľa rôznych pozorovacích vzoriek a typov optických mikroskopov zvyčajne stačí farbiť niektorými fixnými farbivami. Existuje mnoho a komplikovaných metód na opätovné farbenie vzoriek elektrónového mikroskopu, ako je negatívne farbenie, farbenie striebrom atď.
Pokiaľ ide o zaliatie, parafín, kolódium, želatína atď. sa používajú ako zalievacie činidlá pre rezy optických mikroskopov; epoxidová živica, polystyrénová živica, izobutylénová živica a vo vode rozpustná živica sa používajú ako zalievacie činidlá pre rezy elektrónového mikroskopu.
Aby sa zabezpečilo, že zorné pole mikroskopu môže byť rovnomerne a úplne osvetlené, musí sa pri prvej inštalácii a ladení mikroskopu nastaviť optický systém osvetlenia. Je to dôležitý prostriedok a najzákladnejší spôsob, ako správne používať mikroskop a získať správne a spoľahlivé výsledky. požiadavky. Okrem toho správne zvládnutie nastavenia systému optickej dráhy osvetlenia je nevyhnutným krokom po výmene žiarovky svetelného zdroja počas používania mikroskopu a je tiež nevyhnutným prostriedkom na občasnú kontrolu výkonu mikroskopu počas každodenného používania. použitie. Nastavenie systému optickej dráhy osvetlenia mikroskopu zahŕňa najmä tieto štyri položky: 1. Predbežné nastavenie komory lampy zdroja svetla mimo mikroskopu ① Najprv otvorte kryt komory lampy, stlačte pružinovú sponu, aby ste vložili halogénovú žiarovku do objímky a zabráňte priamemu kontaktu so žiarovkou prstami počas inštalácie (možno ju oddeliť mäkkou handričkou alebo papierom), aby ste sa vyhli odtlačkom prstov a iným nečistotám, ktoré ovplyvnia životnosť žiarovky. ②Položte lampu na stôl, po zapnutí pomocou špeciálneho skrutkovača nastavte otvor pre zaostrovací gombík lampy (označený „←→“) tak, aby sa vlákno premietalo na stenu 1-2 m a obraz vlákna sa upraví. Potom nastavte výšku žiarovky a nastavte otvor pre závit (označený „──“) tak, aby bola poloha vlákna vhodná; potom nastavte ľavú a pravú polohu žiarovky, aby ste upravili otvor pre skrutku (označený „──“), aby bola ľavá a pravá poloha vlákna vhodná.
2. Účelom kontroly a korekcie polohy svetelného zdroja svetelného zdroja (vlákna) v mikroskope je nastaviť obrazový koniec iluminátora kolmo do zorného poľa šošovky objektívu a zabezpečiť, aby zorné pole mikroskop je úplne a rovnomerne osvetlený z perspektívy svetelného zdroja. Osvetlenie, ktoré je predpokladom pre nastavenie osvetľovacej sústavy Kuhler. Potrebné základné nástroje: Centrovací teleskop je vybavený pri kúpe mikroskopu. ① Odpojte puzdro z matného skla v kryte lampy a umiestnite kryt lampy späť na mikroskop. ② Vyberte si šošovku objektívu 10×, zapnite program svetelného zdroja, aby ste našli vzorku a jasne ju zaostrili, a potom použite šošovku objektívu s veľkosťou 40× na jasné zaostrenie vzorky (šošovka objektívu 40× Môžete vidieť celý obrázok vlákna ); ③ Otvorte apertúrnu clonu a clonu poľa kondenzora na maximum; ④ Odpojte jeden z okulárov, nahraďte ho centrovacím teleskopom, uchopte bielu časť, druhou rukou natiahnite čierny okulár. V zornom poli môžete vidieť obraz vlákna; ⑤ Ak poloha vlákna nie je vhodná, upravte otvor „──“, aby ste upravili obraz vlákna v horizontálnom smere, a upravte otvor „──“, aby ste upravili obraz vlákna vo vertikálnom smere, kým neupravíte obraz vlákna. na svetelný kruhový obraz, ktorý práve vypĺňa otvor šošovky objektívu; ⑥ Po nastavení vložte puzdro z matného skla späť do pôvodnej polohy, odpojte centrovací teleskop a vymeňte okulár pre ďalšie nastavenie. Vyššie uvedené nastavenie osvetľovacej komory svetelného zdroja mimo mikroskopu a overenie polohy svetelného telesa svetelného zdroja vo vnútri mikroskopu je potrebné vykonať len pri prvej inštalácii a odladení mikroskopu a pri výmene žiarovky a mikroskop sa pri používaní mikroskopu nedá nastaviť náhodne. V prípade zmätku je možné ho upraviť späť do pôvodného stavu podľa vyššie uvedených krokov.
3. Správne nastavenie systému osvetlenia Kohler Jednou z hlavných úloh správneho nastavenia mikroskopu je nastavenie systému optickej dráhy osvetlenia a kľúčové je nastavenie systému osvetlenia Kohler. Každý, kto používa mikroskop, najmä ten, kto robí mikrofotografie, by mal mať určité pochopenie a zvládnutie princípu osvetľovacieho systému Kuhler a jeho nastavovacích krokov, aby mohol naplno využívať funkcie mikroskopu a fotografovať. Fotografie, ktoré sa objavia, môžu byť konzistentnejšie a dokonalejšie. Princíp osvetľovacieho systému Kohler je jednoduchý: svetlo vyžarované ktorýmkoľvek bodom na osvetlení zdroja svetla môže osvetliť zorné pole mikroskopu a svetlo vyžarované každým bodom osvetľovacieho zdroja svetla sa zhromažďuje a v poli pohľadu mikroskopu Dosiahne sa veľmi plné a rovnomerné osvetlenie. Účelom nastavenia Kuhlerovho osvetľovacieho systému je získať rovnomerné a dostatočné osvetlenie pre pozorované zorné pole a zabrániť rušivému svetlu ovplyvňovať alebo rušiť zobrazovací systém, aby sa zabránilo zahmlievaniu filmu počas fotografovania. Nevyhnutné komponenty pre vysoko nastaviteľný osvetľovací systém Kohler: clona poľa, systém kondenzorových šošoviek, ktorý možno nastaviť na osi. ① Zvoľte 10× šošovku objektívu a 10× okulár ② Vložte prednú šošovku kondenzora do optickej dráhy, nastavte apertúrnu clonu do strednej polohy (nie príliš veľkú alebo malú), potom zdvihnite kondenzor do hornej polohe a nastavte otočný tanier kondenzora do polohy „J“ pre svetlé pole ③ Nastavte clonu poľa na minimum (0,1)
④ Vložte zapečatenú biologickú vzorku na stolík, zapnite zdroj svetla a zreteľne zaostrite
⑤ V zornom poli bude čiastočne osvetlená oblasť alebo svetlý bod, čo je rozmazaný obraz clony poľa, v ktorom je možné jasne vidieť detaily vzorky;
⑥Jemne nastavte kondenzor smerom nadol, aby sa svetlý bod v zornom poli postupne zmenšoval a postupne sa z neho stal jasný polygonálny obraz, ktorý je jasným obrazom clony poľa;
⑦ Vo všeobecnosti nie je polygonálny obraz v strede zorného poľa a je potrebné nastaviť pár centrovacích skrutiek kondenzora, aby sa polygonálny obraz clony poľa nastavil do centrálnej polohy;
⑧Postupne otvárajte clonu zorného poľa, aby sa z polygónového obrazu stal vpísaný polygón zorného poľa, a ďalej skontrolujte stav zarovnania. Ak zarovnanie nie je ideálne, pokračujte v dolaďovaní zarovnávacej skrutky;
⑨Jemne otvorte clonu zorného poľa tak, aby jej polygonálny obraz zmizol na okraji zorného poľa. Zatiaľ je dokončená úprava osvetľovacieho systému Kohler. Po nastavení systému osvetlenia Kohler je celé zorné pole rovnomerne osvetlené a zhotovené mikrofotografie sú jasné a jasné s normálnym kontrastom.
