Úprava systému zobrazovania optickej dráhy svetelného mikroskopu a obrys mikroskopického vyšetrenia
Úprava systému zobrazovacej optickej dráhy a obrysu mikroskopického vyšetrenia
Úprava zobrazovacieho optického systému mikroskopu sa vykonáva podľa potrieb rôznych mikroskopických techník. Takzvaná mikroskopia je v skratke metóda osvetlenia používaná pri pozorovaní vzorky mikroskopom a technika a metóda na získanie lepšieho kontrastu v obraze tvorenom vzorkou. Nasledujúci text stručne popisuje, ako mikroskopia dozrela v niekoľkých metódach a zodpovedajúcu metódu nastavenia optického systému zobrazovania mikroskopu.
1. Svetlé pole prenosu:
Toto je najtradičnejšia a najbežnejšia metóda aplikácie od vynálezu mikroskopu. Základné komponenty: a. Objektív: na pozorovanie v jasnom poli možno použiť akúkoľvek šošovku objektívu; b. Pozorovací ďalekohľad: možno použiť všetky druhy pozorovacích ďalekohľadov, najlepšie vybavené apertúrnou clonou. Metóda nastavenia: Po nastavení osvetľovacieho systému Kuhler vyššie uvedeného mikroskopu je možné použiť metódu svetlého poľa. Rozsah použitia: všetky zafarbené rezy tkaniva, krvné nátery atď. Bezpečnostné opatrenia: a. Pri použití metódy pozorovania vo svetlom poli je potrebné nastaviť osvetľovací systém Kuhler; b. Clona zorného poľa by sa nemala svojvoľne otvárať a predná šošovka kondenzorového zrkadla by mala byť umiestnená fakticky von a do optickej dráhy pri použití šošoviek objektívu 10×, menej ako 10× a viac ako 10 ×; c. Apertúrna clona kondenzorového zrkadla by sa nemala používať na nastavenie jasu zorného poľa a výška zrkadla kondenzora by sa nemala nastavovať bez rozdielu, inak sa zníži rozlíšenie mikroskopu a rozlíšenie zafarbeného tkaniva bude poškodený. rozlíšenie mikroskopu a poškodenie bolo prispôsobené osvetľovaciemu systému Kuhler; d. pre mikrofotografie, pri každej zmene použitia zväčšenia šošovky objektívu musíte nastaviť apertúrnu clonu kondenzorovej šošovky tak, aby sa jej veľkosť presne rovnala numerickej apertúre použitej v šošovke objektívu 2/3.
2. Metóda fázového kontrastu prechádzajúceho svetla:
Ide o moderné mikroskopické vyšetrenie metódy zvýšenia kontrastu. Základné komponenty: šošovka objektívu s fázovým kontrastom, jasné zorné pole a viacúčelový ďalekohľad s fázovým kontrastom, zaostrovací ďalekohľad, zelené filtre.
Spôsoby úpravy:
a. Na základe nastavenia osvetľovacieho systému Kuhler jasne zaostrite vzorku pomocou metódy svetlého poľa
b. Otočte ďalekohľad na Ph1, aby ste zarovnali polohu stupnice, vyberte šošovku objektívu s 10-násobným fázovým kontrastom a vymeňte priehľadnú vzorku, ktorú chcete pozorovať.
c. Odpojte jeden z okulárov, nahraďte ho centrovaným teleskopom a zaostrite na dva krúžky fázového kontrastu v zornom poli (čierny krúžok fázového kontrastu šošovky objektívu a krúžok fázového kontrastu prestupu svetla na kondenzorovej šošovke).
d. Dva krúžky fázového kontrastu v zornom poli sa nemusia nevyhnutne zhodovať, nastavte dve nastavovacie zariadenia na pozorovacom ďalekohľade (nastavte ľavú a pravú polohu páčky nastavenia krúžku fázového kontrastu a nastavte prednú a zadnú polohu trecieho gombíka) , aby sa krúžok priepustnosti svetla pre prednú a zadnú stranu vpravo a vľavo zhodoval s čiernym krúžkom
e. Po nastavení sa vráťte späť do okuláru na pozorovanie a zatlačte zelený filter do optickej dráhy, aby ste pozorovali fázový kontrastný obraz vzorky.
f. Ak sú na pozorovanie k dispozícii šošovky objektívu 20× a 40×, šošovka by mala byť nastavená do polohy Ph2 a pri použití šošoviek so 100 objektívmi by mala byť šošovka nastavená na polohu Ph3.
Rozsah použitia: Je vhodný na pozorovanie priehľadných, nezafarbených alebo nezafarbených vzoriek, ako sú všetky druhy buniek, živé tkanivá, nezafarbené alebo nezafarbené rezy tkanív, vodné organizmy a pod.
3. Diferenčná interferenčná metóda fázového kontrastu:
Aby sa prekonala metóda fázového kontrastu pozorovania detailov vzorky okolo obrazu sprevádzaná halo, zamaskuje detaily, ktoré mali byť vidieť, ako aj vzorky alebo tkanivové rezy vyžadujú v zásade pomerne tenkú hrúbku. byť hrubšie ako 10?m a ďalšie obmedzenia, použitie princípu dvojlúčovej interferencie na návrh metódy fázového kontrastu subdiferenciálnej interferencii.
Spôsoby úpravy:
a. Metóda DIC musí byť upravená na základe toho, že systém Kulemin už bol nastavený
b. Pomocou 10× šošovky objektívu určite polohu zaostrenia šošovky objektívu, ktorá dokáže jasne vidieť vzorku s jasným zorným poľom.
c. Umiestnite polarizátor do osvetľovacej dráhy, pričom si všimnite, že by mal byť orientovaný v smere východ-západ.
d. Otočte volič kondenzora do polohy zodpovedajúcej použitiu 10 × objektívu, tj DIC 0.3-0.4.
e. Vložte posúvač DIC pre šošovku 10× na zadnú stranu šošovky objektívu alebo na konvertor objektívu.
f. Vložte analyzátor do zobrazovacej optickej dráhy a všimnite si, že jeho orientácia by mala byť na juh-sever.
g. Vymeňte priehľadnú vzorku, ktorú chcete pozorovať, zapnite zdroj svetla, aby ste vzorku jasne zaostrili.
h. Upravte vložku DIC tak, aby obraz diferenciálneho interferenčného kontrastu dosiahol najlepší efekt, to znamená najzreteľnejší reliéfny efekt.
i. Zároveň nastavte apertúrnu clonu kondenzorového zrkadla, aby bol optimálny aj efekt kontrastu.
j. Potom dolaďte detaily vzorky, aby ste videli štruktúru vzorky na rôznych úrovniach.
k. Ak sa vloží doplnková farba (červená spomaľovacia doska prvého rádu) a súčasne sa nastaví vložka DIC, v zornom poli je možné vidieť neustále sa meniace žiarivé farby s červenou, oranžovou, žltou, zelenou, modrou, fialová, ružová, ružovofialová a zlatožltá. Rozsah použitia: priehľadné alebo nefarbiteľné tkanivové rezy, hrúbka do cca 100?m, živé tkanivo a živé bunky v kultúre, malé živé organizmy a pod.
