Fluorescenčné mikroskopy sú rozdelené do dvoch typov na základe ich optických dráh:
1. Transmisný fluorescenčný mikroskop: Zdroj excitačného svetla sa používa na vybudenie fluorescencie prechodom cez materiál vzorky cez kondenzorovú šošovku. Môžu sa použiť aj bežne používané koncentrátory tmavého poľa a bežné koncentrátory sa môžu použiť na nastavenie reflektora tak, aby presmeroval a postranné laloky excitačného svetla na vzorku. Toto je relatívne starý-módny fluorescenčný mikroskop. Jeho výhodou je silná fluorescencia pri malom zväčšení, nevýhodou však je, že jeho fluorescencia s rastúcim zväčšením klesá. Preto je lepšie na pozorovanie väčších vzoriek materiálov.
2. Fluorescenčný mikroskop s padajúcim svetlom je nový typ fluorescenčného mikroskopu vyvinutý v modernej dobe. Na rozdiel od vyššie uvedeného dopadá excitačné svetlo zo šošovky objektívu smerom nadol na povrch preparátu, pričom sa na zber fluorescencie používa rovnaká šošovka objektívu ako osvetľovací kondenzor a šošovka objektívu. K optickej dráhe, ktorá je od svetelného uránu vzdialená 45 stupňov, je potrebné pridať dvojfarebný rozdeľovač lúčov. Uhol, excitačné svetlo sa odráža do šošovky objektívu a zaostrí sa na vzorku. Fluorescencia generovaná vzorkou, ako aj excitačné svetlo odrazené od povrchu šošovky objektívu a krycieho skla, vstupujú do šošovky objektívu a vracajú sa do dvojfarebného rozdeľovača lúčov, čím sa oddeľuje excitačné svetlo a fluorescencia. Zvyškové excitačné svetlo je potom absorbované blokovacím filtrom. Ak sa použijú rôzne kombinácie excitačných filtrov/dvojfarebných lúčových separátorov/blokovacích filtrov, môžu spĺňať potreby rôznych fluorescenčných reakčných produktov. Výhody tohto fluorescenčného mikroskopu sú rovnomerné osvetlenie poľa, jasné zobrazenie a silnejšia fluorescencia s väčším zväčšením.
(2) Návod na používanie fluorescenčného mikroskopu
1. Zapnite zdroj svetla. Ultra-vysokotlaková ortuťová výbojka sa musí na niekoľko minút predhriať, aby sa dosiahol maximálny jas.
2. Transmisná fluorescenčná mikroskopia vyžaduje inštaláciu požadovaného excitačného filtra medzi zdroj lampy a kondenzor a zodpovedajúci blokovací filter za šošovku objektívu. Fluorescenčný mikroskop s padajúcim svetlom potrebuje vložiť požadovaný excitačný filter/dvojfarebný rozdeľovač lúčov/blokovací blok filtra do štrbiny optickej dráhy.
3. Pozorujte mikroskopom s nízkym{1}}výkonom a upravte stred svetelného zdroja podľa nastavovacieho zariadenia rôznych typov fluorescenčných mikroskopov tak, aby bol umiestnený v strede celého osvetľovacieho bodu.
4. Umiestnite preparát a zaostrite ho na pozorovanie. Počas používania by ste mali venovať pozornosť: Pred inštaláciou filtra nepozorujte priamo očami, aby ste predišli poškodeniu zraku; Pri pozorovaní vzoriek olejovým mikroskopom sa musí použiť špeciálny nefluorescenčný olejový mikroskop; Po vypnutí-vysokotlakovej ortuťovej výbojky ju nemožno okamžite znova zapnúť. Reštartovanie trvá 5 minút, inak bude nestabilné a ovplyvní životnosť ortuťovej výbojky.
(3) Pozorovaním pod fluorescenčným mikroskopom na vyučovacej platforme s použitím filtra s modrofialovým svetlom je možné vidieť bunky zafarbené fluorescenčným farbivom s 0,01 % akridínovou oranžovou farbou. Jadro a cytoplazma sú excitované, aby produkovali dve rôzne farby fluorescencie (tmavozelenú a oranžovú červenú).
