Meranie objemu tkanivového bloku pomocou biologických mikroskopov
Kryofixácia, mrazené ultra{0}}tenké rezy a lyofilizácia{1}} sú zatiaľ rutinnými metódami pre tkanivovú a bunkovú röntgenovú{{2}mikroskopiu. Uveďte nasledujúce podrobnosti týkajúce sa tejto metódy:
Biologický mikroskop s bodovým svetlom môže pohybovať reflektorom nahor a nadol, aby sa dosiahol mierny jas, a clona premenlivej clony sa môže tiež zmeniť, aby sa dosiahol mierny jas. Ak je svetlo zo slnka, reflektor sa môže primerane zvýšiť a clona premenlivého svetla sa môže primerane zväčšiť. Ak je svetlo príliš silné, môže byť reflektor primerane znížený a clona križovatky môže byť primerane zmenšená. Ak sa v tejto situácii stále cítite oslnivo, môžete sa rozhodnúť umiestniť vhodný filter na držiak pod reflektor. Tento dub môže dosiahnuť jas, ktorý vás uspokojí. Samozrejme, nastavením hornej a dolnej polohy reflektora sa dá zmeniť veľkosť clony čítania svetla a vybrať vhodné filtre, čo si vyžaduje určitú prax a skúsenosti.
Veľmi dôležitou otázkou v biologickej mikroskopii je proces odberu vzoriek a izolácie buniek. Po lyofilizácii-a zaliatí živicou (FD) musia byť zmrazené ultra-tenké rezy starostlivo spracované, aby sa zabezpečilo, že obsah 65 prvkov každej časti nebude počas pozorovania a analýzy poškodený. Kvôli početným krokom a vysokým nákladom, ktoré sú súčasťou röntgenovej mikroanalýzy, je poľutovaniahodné vyvodiť nesprávne závery, ak sú analyzované bunky poškodené alebo mŕtve po dlhom a viacstupňovom spracovaní. Bunky myokardu oddelené pôsobením želatinázy majú dve formy, jedna má tvar dlhej tyčinky a druhá je kruhová. Ten sa týka odumierajúcich buniek, ktoré sú poškodené počas procesu bunkovej separácie.
Obsah a distribúcia elektrolytov v týchto dvoch typoch buniek sú pod biologickým mikroskopom veľmi odlišné. Na je veľmi vysoká a K je extrémne nízka v kruhových kardiomyocytoch a koncentrácia Ca v lineárnych dendritoch je veľmi vysoká. Po overení inými analytickými metódami sa dokázalo, že vysoký obsah Na a nízky obsah K v kruhových bunkách a vysoký obsah Ca v mitochondriách sú výsledkom poškodenia membrány počas separácie buniek. Metóda fixácie za studena pre bunky a tkanivá často zahŕňa najprv ochladenie a potom ich uskladnenie v tekutom dusíku. Pre konzervačný efekt je rozhodujúca fixácia kalením. Živé bunky alebo čerstvé tkanivá sú bohaté na vodu a po ochladení sú časti buniek alebo tkanív, ktoré prichádzajú do priameho kontaktu s chladivom (najmä pri použití tekutého dusíka na chladenie), často zmrazené a fixované ako prvé, čím sa vytvorí „škrupina“, ktorá bráni rozdrveniu a fixácii centrálnej časti buniek. Preto sa pri vykonávaní röntgenovej mikroanalýzy často zistí, že kryštály ľadu existujú v centrálnej časti väčších buniek. Aby k tejto situácii nedošlo, používa sa ako chladivo látka s bodom topenia vyšším ako kvapalný dusík, ale nižším o 806 c. Týchto látok je veľa, ale dajú sa ľahko zohnať a cenovo najdostupnejší je koncentrovaný propán (bod varu 42,120c, bod topenia 187,10c, molekulová hmotnosť 44,1), ktorý má aj rýchlu rýchlosť chladenia. Ale jeho nevýhodou je, že je horľavý.
