Metóda priameho počítania mikrobiálneho mikroskopu
Experimentálne kroky (metóda priameho počítania mikrobiálneho mikroskopu)
1. Riedenie
Suspenziu pivovarských kvasníc primerane rozrieďte. Ak bakteriálny roztok nie je koncentrovaný, nie je potrebné ho riediť.
2. Mikroskopická vyšetrovacia a počítacia miestnosť
Pred pridaním vzoriek vykonajte mikroskopické vyšetrenie počítacej komory počítacej dosky. Ak sú nečistoty, je potrebné ich pred počítaním vyčistiť.
3. Pridajte vzorky
Zakryte čistú a suchú doštičku na počítanie krviniek krycím sklom a potom pomocou sterilného kvapkadla s jemnými ústami kvapnite malú kvapku (nie príliš veľa) zriedeného roztoku kvasníc z okraja krycieho skla. Nechajte bakteriálny roztok vstúpiť do počítacej komory pozdĺž medzery kapilárnou permeáciou. Vo všeobecnosti môže byť počítacia komora naplnená bakteriálnym roztokom. Dávajte pozor, aby ste nevytvorili bubliny.
4. Mikroskopické počítanie
Po 5 minútach odpočinku umiestnite dosku na počítanie krviniek na stolík mikroskopu, najskôr pomocou mikroskopu s nízkym výkonom určte polohu počítacej miestnosti a potom prepnite na počítanie na vysokovýkonný mikroskop. Ak sa pred počítaním zistí, že bakteriálny roztok je príliš hustý alebo príliš riedky, treba pred počítaním znovu upraviť riedenie. Všeobecnou požiadavkou na riedenie vzorky je, že na malú bunku by malo byť približne 5-10 bakteriálnych tiel. Vyberte 5 buniek z každej počítacej miestnosti (voliteľné 4 rohové a stredné bunky) na počítanie. Mycélium umiestnené na čiare mriežky sa vo všeobecnosti počíta len s hornou a pravou čiarou. Ak kvasinky vyklíčia a veľkosť púčika dosiahne polovicu materskej bunky, odoberú sa dva počty baktérií. Na počítanie vzorky by sa mal vypočítať obsah baktérií vo vzorke na základe hodnôt získaných z dvoch počítacích komôr.
5. Vyčistite dosku na počítanie krviniek
Po použití opláchnite dosku na počítanie krviniek vodným stĺpcom na vodovodnom kohútiku. Na umývanie nepoužívajte tvrdé predmety. Po umytí ho osušte na vzduchu samostatne alebo vyfúkajte fénom. Mikroskopické vyšetrenie, pozorovanie, či sú v každej malej bunke zvyškové bakteriálne telá alebo iné zrazeniny. Ak nie je čistý, treba ho opakovane umývať, kým nebude čistý.
