Poznámky a tipy na používanie niekoľkých mikroskopov s fázovým kontrastom
1) Nainštalujte zariadenie na fázový kontrast: odstráňte kondenzorovú šošovku bežného mikroskopu a nainštalujte kondenzorovú šošovku s prstencovou clonou na zodpovedajúci mikroskop; odstráňte bežnú šošovku objektívu z mikroskopu a nahraďte ju šošovkou objektívu s fázovou doskou; vymeňte okulár za zaostrovacie okuláre pre mikroskopy s fázovým kontrastom; špeciálne zelené filtre (niekedy nie sú potrebné) sú umiestnené na vstupe svetla do svetelného zdroja.
2) Zarovnanie a zaostrenie svetla: Upravte zaostrovací okulár a skrutku na nastavenie hrúbky, kým nebude v zornom poli jasne vidieť biely kruh a čierny kruh. Čierny kruh je pevný a biely kruh je možné posúvať nastavením skrutky na kondenzačnom zariadení tak, aby sa čierny kruh a biely kruh úplne zhodovali. Zložte zaostrovací okulár a nahraďte ho originálnym okulárom mikroskopu, aby ste ho skontrolovali.
Analýza problémov pri použití mikroskopu s fázovým kontrastom
1. Vplyv hrúbky vzorky Pri pozorovaní fázového kontrastu by hrúbka vzorky mala byť 5 μm alebo menej. Pri použití hrubšej vzorky je horná vrstva vzorky veľmi číra, ale hlboká vrstva bude rozmazaná a spôsobí interferenciu fázového posunu. a rozptyl svetla.
2. Vplyv krycieho sklíčka a podložného sklíčka Vzorka musí byť zakrytá krycím sklom, inak sa svetlý prstenec prstencovej membrány a tmavý prstenec fázovej platne ťažko prekrývajú. Pozorovanie fázového kontrastu má tiež vysoké požiadavky na kvalitu skla diapozitívov a krycieho skla. Ak sa objavia škrabance, nerovnomerná hrúbka alebo nerovnomernosť, dôjde k skresleniu jasných prstencov a fázovej interferencii. Okrem toho, keď je sklíčko príliš hrubé alebo príliš tenké, svetlý prstenec prstencovej membrány sa zväčší alebo zmenší.
3. Halo a fading efekt V procese zobrazovania mikroskopom s fázovým kontrastom, keď štruktúra stmavne v dôsledku fázového oneskorenia, nejde o stratu svetla, ale o výsledok redistribúcie svetla v rovine obrazu. Takže svetlo, ktoré sa zjavne stráca v tmavých oblastiach, sa bude javiť ako jasné halo okolo tmavších objektov. Toto je nevýhoda mikroskopie s fázovým kontrastom, ktorá bráni pozorovaniu jemných štruktúr a jav halo je závažnejší, keď je prstencová clona veľmi úzka. Ďalším javom v mikroskopii s fázovým kontrastom je efekt tieňovania, ktorý sa týka straty kontrastu na okrajoch väčšej plochy s rovnakým fázovým oneskorením pri pozorovaní fázovým kontrastom.
4. Inverzia fáz Keď n'n, kontrast svetla a tmy je presne opačný, čo sa nazýva fázová inverzia. Nie je rozpoznateľné, keď sa fázový rozdiel δ=0 a kontrast zväčšujú so zvýšením δ, a fázová inverzia sa objaví, keď δ naďalej rastie na určitú hodnotu. Pri použití objektívu s 90 percentami vysokej hodnoty absorbancie (vysoký kontrast) je táto transformačná hodnota približne 0,55λ a pri použití objektívu so 70 percentnou štandardnou hodnotou absorbancie je to približne 0,33λ . Na vyriešenie menších rozdielov v optickej dráhe by sa mali použiť objektívy s vyššími hodnotami absorbancie.
