Princípy mikroskopických mikrometrov na určovanie veľkosti buniek
Princíp stanovenia veľkosti mikrobiálnych buniek pomocou mikroskopického mikrometra
Veľkosť mikrobiálnych buniek je jedným z dôležitých základov pre klasifikáciu a identifikáciu mikroorganizmov. Mikroorganizmy sú maličké a musia
Treba ju pozorovať pomocou mikroskopu a na meranie veľkosti mikrobiálnych buniek ju treba merať aj pod mikroskopom pomocou špeciálneho mikrometra.
Mikrometer sa skladá z dvoch častí: stolový mikrometer a očný mikrometer.
Stolový mikrometer je kus skla s vyrytým stredom (obr. 2-7), celková dĺžka stupnice je l mm, rozdelená na 100 malých dielikov, každý dielik je dlhý 10 μm,
Určené na kalibráciu okulárových mikrometrov. Mikrometer okuláru je možné priamo použiť na meranie veľkosti bunky, ide o kruhové sklíčko (obr.
Pri meraní ho umiestnite na prepážku v okulári. Celková dĺžka stupnice okulárneho mikrometra je l cm, rozdelená na 100 malých dielikov, pričom každý dielik je dlhý 100 μm.
Keďže okulárový mikrometer meria veľkosť obrazu mikrobiálnej bunky po jej zväčšení mikroskopom, skutočná dĺžka reprezentovaná mierkou sa mení podľa zväčšenia použitého okuláru a šošovky objektívu a veľkosti tubusu šošovky.
Pred použitím je preto potrebné ho kalibrovať pomocou stolového mikrometra, aby sa zistila dĺžka reprezentovaná každou malou mriežkou mikrometra okulára pri určitom zväčšení, a potom pomocou mikrometra okuláru priamo zmerať veľkosť meraného objektu.
Výpočet korekčného faktora stupnice mikrometra okuláru (kalibračný faktor): stupnica mikrometra okuláru
(μ=známa vzdialenosť medzi dvoma prekrývajúcimi sa čiarami na stolovom mikrometri / dve prekrývajúce sa čiary m) stupnica mikrometra okulára
Príklad 1: Ak je známa vzdialenosť medzi dvoma prekrývajúcimi sa čiarami 2-stupňové mikrometrické stupnice (2 X 10 μ
m), čo zodpovedá 13 mikrometrickým stupniciam okuláru, potom korekčný faktor každej mikrometrovej stupnice okuláru=20 μm / 13=1,54 μm
Príklad 2: Ak sa mikroorganizmus pozoruje mikrometrom okuláru mikroskopu a dĺžka je 5 mikrometrových mierok okuláru, potom
Dĺžka mikróbov=počet dielikov mikrometra okulára X korekčný faktor pre každý dielik mikrometra okuláru=5 X 1,54 μm=7,70 μm
