Správne používanie invertovaného fluorescenčného mikroskopu
Invertovaný fluorescenčný mikroskop je multifunkčný mikroskop používaný v oblasti špičkového biologického vedeckého výskumu. Jeho štruktúra je zložitá a drahá. Preto, aby absolventi medicíny správne pochopili obsluhu a používanie invertovaného fluorescenčného mikroskopu, musia učitelia najskôr predviesť skutočnú činnosť invertovaného fluorescenčného mikroskopu. Predtým bol zriadený kurz na osvojenie si základných poznatkov o invertovaných fluorescenčných mikroskopoch, predstavenie štruktúry, princípu, funkcie a základných metód použitia invertovaných fluorescenčných mikroskopov a následne v konkrétnej prevádzke na rôznych vzorkách demonštrovať rôzne funkcie, od plytkých. do hĺbky, postupne Štandardizovať používanie inverzných fluorescenčných mikroskopov študentmi doktorandského štúdia medicíny.
1. Správne používanie pozorovania vo svetlom poli. Jednou z funkcií inverzného fluorescenčného mikroskopu je pozorovanie v jasnom poli. Základným princípom je, že po ožiarení preparátu svetlom je absorpcia svetla každej časti odlišná, aby sa realizovalo zobrazenie na jasnom pozadí. Je vhodný hlavne na farbené alebo farebné bunky, pozorovanie vzoriek, ako sú rezy tkanív.
2. Správne použitie pozorovania fázového kontrastu. Druhou funkciou invertovaného fluorescenčného mikroskopu je pozorovanie fázového kontrastu. Jeho základným princípom je previesť rozdiel optickej dráhy rôznych častí vzorky na rozdiel amplitúd. Pozorovanie sa realizuje prostredníctvom objektívu s fázovým kontrastom s fázovou doskou a kondenzorovej šošovky s prstencovou clonou. Používa sa hlavne na pozorovanie živých buniek alebo nezafarbených tkanivových rezov, v procese experimentálnej výučby, okrem správneho vedenia študentov doktorandského štúdia medicíny k dodržiavaniu základných operačných metód pozorovania fázového kontrastu, je dôležitejšie viesť ich k pochopiť a ovládať vzorky používané na pozorovanie fázového kontrastu. Pre nich je v budúcom vedeckom výskume najčastejšie využívané mikroskopické pozorovanie kultivovaných buniek. V prvom rade sa pre výber bunkového vybavenia všeobecne odporúča používať sklenené a plastové kultivačné misky, kultivačné platne a kultivačné fľaše. Väčšina z nich je bezfarebná a priehľadná a možno ich pozorovať priamo na inverznom fluorescenčnom mikroskope bez vylievania bunkovej tekutiny a iných úprav. Po druhé, počas mikroskopického pozorovania ľubovoľne neotvárajte kryt zariadenia, aby ste nekontaminovali bunky. Napokon, pre operátorov je potrebné, aby nosili rukavice, masky a biele plášte, ktoré môžu nielen chrániť ich vlastné zdravie, ale aj zabrániť kontaminácii buniek.
3. Správne použitie pozorovania fluorescencie. Treťou funkciou inverzného fluorescenčného mikroskopu je pozorovanie fluorescencie. Základným princípom je použitie excitačného svetla na excitáciu vzorky, aby sa vytvorila fluorescencia, aby sa realizovalo pozorovanie tvaru a polohy vzorky. Je vhodný hlavne na pozorovanie fluorescenčne značených vzoriek. Fluorescenčné pozorovanie je dôležitou funkciou inverzného fluorescenčného mikroskopu a jeho príslušenstvo je drahé a špeciálne na použitie. Aby študenti medicíny správne pochopili fungovanie a využitie fluorescenčného pozorovania, učitelia by ich mali naučiť nielen základné operačné metódy, ale čo je dôležitejšie, naučiť ich ovládať jeho špecifiká. Po prvé, pri príprave vzoriek by podložné sklíčko a krycie sklíčko mali mať hladký povrch a vhodnú hrúbku (sklo podložného sklíčka by malo byť medzi 0,8 mm a 1,2 mm a krycie sklíčko by malo mať približne { {5}}.17 mm); vzorka by mala mať primeranú hrúbku a zabrániť prekrývaniu buniek alebo maskovaniu nečistotami; montážne médium by malo používať rovnaký objem zmesi glycerolu a karbonátového pufra (0,5 mol/l pH 9.0-9,5). Po druhé, pred fluorescenčným pozorovaním by sa malo vypnúť elektrické svetlo v miestnosti a biele svetlo inverzného fluorescenčného mikroskopu, aby sa zabezpečilo prostredie v tmavej miestnosti. Nakoniec, pri pozorovaní fluorescencie by mal byť čas pozorovania prísne kontrolovaný, vo všeobecnosti je vhodný 1-2 hodín/čas, inak fluorescencia zoslabne a zmizne; pri nastavovaní svetelného zdroja noste ochranné okuliare, aby ste predišli poškodeniu okuliarov ultrafialovým žiarením.
4. Správne používanie snímania obrazu. Vo vedeckom výskume sa vyžaduje nielen to, aby invertovaný fluorescenčný mikroskop mohol realizovať rôzne pozorovania, ale vyžaduje sa aj to, aby invertovaný fluorescenčný mikroskop mohol realizovať snímanie obrazu. Systém invertovaného fluorescenčného mikroskopu kombinuje optický mikroskop s počítačom prostredníctvom fotoelektrickej konverzie, a to nielen na mikroskopické pozorovanie na okuláre, ale aj na dynamické pozorovanie obrazu v reálnom čase, úpravu a ukladanie v počítači.
