Princípy a štrukturálne charakteristiky fluorescenčných mikroskopov
Fluorescenčný mikroskop využíva vysoko účinný bodový svetelný zdroj na vyžarovanie určitej vlnovej dĺžky svetla (ako je ultrafialové svetlo 3650 alebo purpurovo modré svetlo 4200) cez systém farebných filtrov ako excitačné svetlo, ktoré excituje fluorescenčné látky vo vzorke, aby vyžarovali rôzne farby fluorescencie, a potom pozoruje cez zväčšenie šošovky objektívu a okuláru. Týmto spôsobom, aj pri slabej fluorescencii na silnom pozadí, je ľahko rozpoznateľný a má vysokú citlivosť. Používa sa hlavne na štúdium bunkovej štruktúry, funkcie a chemického zloženia. Základná štruktúra fluorescenčného mikroskopu sa skladá z bežného optického mikroskopu a niektorých doplnkov, ako je zdroj fluorescenčného svetla, excitačný filter, dvojfarebný rozdeľovač lúčov a blokovací filter. Fluorescenčný zdroj svetla - zvyčajne používa ultra-vysokotlakové ortuťové výbojky (50 – 200 W), ktoré môžu vyžarovať svetlo rôznych vlnových dĺžok, ale každá fluorescenčná látka má vlnovú dĺžku excitačného svetla, ktorá vytvára najsilnejšiu fluorescenciu. Preto je potrebné pridať excitačné filtre (zvyčajne ultrafialové, fialové, modré a zelené excitačné filtre), ktoré umožnia prechod len určitej vlnovej dĺžky excitačného svetla a ožiarenie preparátu, pričom absorbuje všetko ostatné svetlo. Každá látka po ožiarení excitačným svetlom vyžaruje vo veľmi krátkom čase viditeľnú fluorescenciu s vlnovou dĺžkou dlhšou ako je vlnová dĺžka ožiarenia. Fluorescencia má špecifickosť a je všeobecne slabšia ako excitačné svetlo. Aby bolo možné pozorovať špecifickú fluorescenciu, je potrebné za šošovku objektívu pridať blokovací (alebo potláčajúci) filter.
Jeho funkcie sú dvojaké: po prvé, absorbovať a blokovať excitačné svetlo prenikať do okuláru, aby sa zabránilo rušeniu fluorescencie a poškodeniu očí; po druhé, vybrať a nechať prejsť špecifickou fluorescenciou, ktorá má špecifickú fluorescenčnú farbu. Je potrebné použiť kombináciu dvoch typov filtrov.
