Aké sú požiadavky na vzorky pre svetelnú mikroskopiu?
V procese prípravy vzorky optického mikroskopu je hrúbka rezu vzorky medzi 2 a 25 um; hrúbka plátku elektrónového mikroskopu je do 50-100nm (okrem vysokonapäťového elektrónového mikroskopu môže hrúbka vzorky dosiahnuť 1 um), takže použitá metóda krájania nie je úplne rovnaká.
Nosičom časti optického mikroskopu je sklíčko a nosičom časti elektrónového mikroskopu je nosná mriežka.
Čo sa týka fixácie, rezy optického mikroskopu sú fixované zloženým fixátorom, zatiaľ čo rezy elektrónového mikroskopu sú opakovane fixované jedným fixátorom
Z hľadiska farbenia je farbenie optických vzoriek pomerne jednoduché. Podľa rôznych pozorovacích vzoriek a typu optického mikroskopu zvyčajne stačí použiť nejaké fixné škvrny. Existuje mnoho metód na opätovné farbenie vzoriek elektrónového mikroskopu a sú tiež veľmi komplikované, ako je negatívne farbenie, farbenie striebrom a podobne.
Pokiaľ ide o zaliatie, parafín, kolódium, želatína atď. sa používajú ako zalievacie činidlá pre rezy optických mikroskopov; epoxidová živica, polystyrénová živica, izobutylénová živica a vo vode rozpustná živica sa používajú ako zalievacie činidlá pre rezy elektrónového mikroskopu.
Aby bolo zorné pole mikroskopu rovnomerne a dostatočne osvetlené, je potrebné pri prvej inštalácii a odladení mikroskopu nastaviť systém optickej dráhy osvetlenia. požiadavky. Okrem toho je správne uchopenie nastavenia systému optickej dráhy osvetlenia nevyhnutným krokom po výmene žiarovky v procese používania mikroskopu a je tiež nevyhnutným prostriedkom na občasné otestovanie výkonu mikroskopu v proces každodenného používania. Nastavenie systému optickej dráhy osvetlenia mikroskopu zahŕňa najmä tieto 4 položky: 1. Predbežné nastavenie komory lampy zdroja svetla mimo mikroskopu ① Najprv otvorte plášť komory lampy a zatlačte halogénovú žiarovku do objímky. pružinová spona. Nečistoty, ako sú odtlačky prstov zanechané na žiarovke, ovplyvnia životnosť žiarovky. ②Položte miestnosť s lampou na stôl, po zapnutí napájania pomocou špeciálneho skrutkovača nastavte otvor pre zaostrovací gombík lampy (označený „←→“) tak, aby sa vlákno premietalo na stenu 1-2 m a obraz vlákna sa upraví. Potom nastavte výšku žiarovky, aby ste nastavili otvor pre vlákno (označený „──“), aby bola poloha vlákna vhodná; potom nastavte ľavé a pravé otvory pre skrutky nastavenia polohy žiarovky (označené „──“) tak, aby bola ľavá a pravá poloha vlákna vhodná.
2. Účelom kontroly a korekcie polohy iluminátora svetelného zdroja (vlákna) v mikroskope je upraviť obrazový koniec iluminátora do zorného poľa šošovky objektívu a zabezpečiť, aby zorné pole mikroskopu je plne a rovnomerne prijímaný z perspektívy svetelného zdroja. Osvetlenie, ktoré je predpokladom pre nastavenie osvetľovacej sústavy Kühler. Potrebné základné nástroje: Centrovacie teleskopy sú vybavené zakúpením mikroskopu. ① Odpojte objímku z matného skla v kryte lampy a umiestnite kryt lampy späť na mikroskop ② Vyberte šošovku objektívu s 10×, zapnite program svetelného zdroja, aby ste našli vzorku a jasne upravili zaostrenie, a potom použite objektív so 40× šošovka na jasné zaostrenie vzorky (40× šošovka objektívu Celý obraz vlákna je jasne viditeľný); ③ Otvorte apertúrnu clonu aj clonu poľa kondenzora na maximum; ④ Odpojte jeden z okulárov, nahraďte ho centrovacím teleskopom, uchopte bielu časť a druhou rukou roztiahnite čierny okulár. V zornom poli je vidieť obraz vlákna; ⑤Ak poloha vlákna nie je vhodná, upravte otvor „──“, upravte obraz vlákna v horizontálnom smere, nastavte otvor „──“ a upravte obraz vlákna vo vertikálnom smere, kým neupravíte obraz vlákna na kruh obraz, ktorý práve vypĺňa otvor šošovky objektívu; ⑥ Po nastavení vložte matnú sklenenú objímku späť do pôvodnej polohy, odpojte centrovací teleskop a vymeňte okulár pre ďalšie nastavenie. Vyššie uvedené nastavenie osvetľovacej miestnosti s lampou svetelného zdroja mimo mikroskopu a kalibráciu polohy iluminátora svetelného zdroja vo vnútri mikroskopu je potrebné vykonať len vtedy, keď je mikroskop nainštalovaný a odladený prvýkrát a žiarovka je vymenené. V prípade nejasností ho môžete vrátiť do pôvodného stavu podľa vyššie uvedených krokov.
3. Správne nastavenie systému osvetlenia Kohler (Kohler) Správne nastavenie mikroskopu, jednou z hlavných úloh je nastavenie systému svetelnej dráhy osvetlenia a kľúčové je nastavenie systému osvetlenia Kohler. Každý, kto používa mikroskop, najmä ten, kto robí mikrosnímky, by mal mať určité pochopenie a zvládnutie princípov osvetľovacieho systému Kühler a jeho nastavovacích krokov, aby mohol naplno využiť funkcie mikroskopu. Výsledné fotografie môžu byť konzistentnejšie a efektovo dokonalejšie. Princíp Kühlerovho osvetľovacieho systému je jednoduchý: svetlo vyžarované ktorýmkoľvek bodom na iluminátore svetelného zdroja môže osvetliť zorné pole mikroskopu a svetlo vyžarované každým bodom na iluminátore svetelného zdroja sa zhromažďuje a je v zorné pole mikroskopu. Dosiahne sa veľmi dostatočné a rovnomerné osvetlenie. Účelom nastavenia osvetľovacieho systému Kuhler je získať rovnomerné a dostatočné osvetlenie pre pozorované zorné pole a zabrániť rušivému svetlu ovplyvňovať alebo rušiť zobrazovací systém, aby sa pri fotografovaní zabránilo vytváraniu hmly na negatíve. Základné komponenty vysoko nastaviteľného osvetľovacieho systému Kühler: clona poľa, kondenzačný systém s osovým nastavením. ① Vyberte 10× šošovku objektívu a 10× okulár ② Vložte prednú šošovku kondenzora do optickej dráhy, nastavte apertúrnu clonu do strednej polohy (nie príliš veľkú alebo nie príliš malú), potom zdvihnite kondenzor do hornej polohy a nastavte otočný tanier kondenzora do polohy Svetlé pole „J“ ③ Nastavte clonu poľa na minimum (0,1)
④ Vložte zapečatenú biologickú vzorku na stolík, zapnite zdroj svetla a zreteľne zaostrite
⑤ V zornom poli sa objaví lokálne osvetlená oblasť alebo svetlý bod, čo je rozmazaný obraz clony poľa, na ktorom sú jasne viditeľné detaily vzorky; Pozrite si podrobnosti vzorky jasne
⑥ Mierne sklopte kondenzor, aby sa svetlý bod v zornom poli postupne zužoval a postupne sa z neho stal jasný polygonálny obraz, ktorý je jasným obrazom clony poľa;
⑦ Za normálnych okolností nie je polygonálny obraz v strede zorného poľa. Pre nastavenie polygonálneho obrazu zorného poľa do stredovej polohy je potrebné nastaviť dvojicu centrovacích skrutiek kondenzora;
⑧ Postupne otvárajte clonu zorného poľa, aby sa polygonálny obraz stal vpísaným polygónom zorného poľa, a ďalej skontrolujte stav zarovnania. Ak zarovnanie nie je ideálne, pokračujte v miernom nastavení zarovnávacej skrutky;
⑨ Mierne otvorte clonu poľa, aby sa polygonálny obraz stratil na okraji zorného poľa. V tomto bode je úprava osvetľovacej sústavy Kühler ukončená. Po nastavení osvetľovacieho systému Kühler bolo celé zorné pole osvetlené rovnomerne a mikrofotografie boli jasné a jasné s normálnym kontrastom.
