Prečo je zväčšenie olejovej šošovky väčšie ako zväčšenie obyčajnej šošovky objektívu?
Dôvody, prečo je potrebné baktérie pred farbením v mikrobiologických experimentoch fixovať:
1: Zabite bunky a uľahčite farbenie farbiva.
Po druhé: Zabezpečte, aby baktérie priľnuli k podložnému sklíčku a nedali sa ľahko zmyť vodou.
Pri fixácii pomaly sušte. Ak chcete proces naozaj urýchliť, môžete ho niekoľkokrát vysušiť vo vzdialenosti nad plameňom alkoholovej lampy. Nesušte sklo tak, aby sa zohrialo, inak môže zničiť bakteriálnu formu života.
Gramovo farbenie a mikroskopické pozorovanie baktérií
Experimentálny princíp
Princíp farbenia podľa Grama: Rôzne reakcie baktérií na farbenie podľa Grama sú spôsobené rozdielnym zložením a štruktúrou ich bunkových stien. Bunková stena grampozitívnych baktérií je hlavne sieť peptidoglykánov. Pri spracovaní etanolom sa veľkosť pórov sieťovej štruktúry zmenšuje v dôsledku dehydratácie a znižuje sa priepustnosť, čo spôsobuje tvorbu komplexu kryštálovej fialovej a jódu. Látka sa nedá ľahko eluovať a zostáva v bunkách. Po odfarbení a kontrastnom farbení sa stále zachováva modrofialová farba primárneho farbiva. Peptidoglykánová vrstva bunkovej steny Gram-negatívnych baktérií je tenká a má vysoký obsah lipidov. Preto sa počas odfarbovania lipidy rozpúšťajú etanolom (alebo acetónom) a zvyšuje sa priepustnosť bunkovej steny, čím sa vytvára komplex kryštálovej fialovej a jódu. Je relatívne ľahké ho vymyť. Po kontrastnom farbení kontrastným farbením sa bunky farbia červenou farbou kontrastného farbenia. Princíp mikroskopického zobrazovania: Moderné bežné optické mikroskopy používajú na zväčšenie obrazu dva šošovkové systémy, okuláre a šošovky objektívu, preto sa často nazývajú zložené mikroskopy. V optickom systéme mikroskopu je najdôležitejšia výkonnosť šošovky objektívu. Olejová šošovka má najväčšie zväčšenie a je najdôležitejšia pre mikrobiologický výskum. Hlavným účelom pridávania kvapiek oleja na šošovky medzi sklíčko a šošovku je zvýšiť jas osvetlenia a zvýšiť rozlíšenie mikroskopu. Použitie oleja namiesto vzduchu ako média šírenia svetla znižuje lom alebo úplný odraz svetla, vďaka čomu je pozorovaný obraz jasnejší.
Hľadajte kolónie baktérií, ktoré chcete pozorovať pod mikroskopom s malým zväčšením (pokračujte v pohybe sklíčka, ak cítite červený tieň, okamžite zastavte, upravte zväčšenie, ak nejde o kolóniu, pozerajte sa ďalej), zdvihnite tubus šošovky a potom prepnite na olejovú šošovku. Pridajte kvapku cédrového oleja do oblasti vzorky a pomocou hrubého nastavovača opatrne spustite tubus šošovky tak, aby bola olejová šošovka ponorená v oleji na šošovky a takmer v kontakte so vzorkou. Zdvihnite kondenzor do najvyššej polohy a otvorte clonu. Pomocou hrubého nastavovača pomaly zdvíhajte tubus objektívu, kým sa v zornom poli neobjaví obraz objektu, a pomocou jemného nastavovača ho urobte jasným a zaostreným.
